Angiogênese em feridas cutâneas de ratos diabéticos – efeito da fotobiomodulação na expressão de fator de crescimento do endotélio vascular e de actina de músculo liso

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Souza, Amanda Pires de
Data de Publicação: 2016
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Uninove
Texto Completo: http://bibliotecatede.uninove.br/handle/tede/2844
Resumo: Diabetes mellitus (DM) is a chronic disease caused by both insufficient insulin production and peripheral resistance to insulin. This condition generates hyperglycemia with serious consequences, especially in tissue healing. In this context, the process of formation of new vessels, or angiogenesis is greatly affected. Low-intensity laser photobiomodulation (PBM) has been associated to improvements in both angiogenesis and tissue repair. To understand part of these mechanisms of PBM in diabetic animals, this study evaluated whether PBM causes difference in the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and mature vessels that express smooth muscle actin (SMA) in cutaneous wounds. Ten Wistar rats were used from the UNINOVE breeding stock. Diabetes was induced with streptozotocin (50 mg/kg) and fifteen days after induction the diabetic animals were anesthetized and two dorsal ulcers were made with 8 mm punch. The animals were randomly divided into 2 groups: Control (untreated ulcer), Laser (laser therapy shortly after performing ulcer using diode laser, λ = 660 ± 2 nm, with output power equal to 100 mW and beam area of 0,04 cm2– Therapy XT, DMC, São Carlos, Brazil), with irradiance of 32.7 mW/cm2 for 122 s, delivering a dose of 4 J/cm2. Euthanasia was done 15 days after the injury. Samples were routinely processed for paraffin inclusion and staining with hematoxylin and eosin, immunohistochemistry for SMA and VEGF. The vessels were counted using ImageJ software and the data analyzed statistically. There was no statistical difference between the number of VEGF-labeled blood vessels between the control and laser groups (p = 0.22 - Mann-Whitney test). The amount of mature pots labeled with SMA was also similar between the groups (p = 0.36 - Mann-Whitney Test). Under the study conditions, at 15 days of tissue repair of diabetic rats, photobiomodulation did not cause any difference in angiogenesis
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Low-intensity laser photobiomodulation (PBM) has been associated to improvements in both angiogenesis and tissue repair. To understand part of these mechanisms of PBM in diabetic animals, this study evaluated whether PBM causes difference in the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and mature vessels that express smooth muscle actin (SMA) in cutaneous wounds. Ten Wistar rats were used from the UNINOVE breeding stock. Diabetes was induced with streptozotocin (50 mg/kg) and fifteen days after induction the diabetic animals were anesthetized and two dorsal ulcers were made with 8 mm punch. The animals were randomly divided into 2 groups: Control (untreated ulcer), Laser (laser therapy shortly after performing ulcer using diode laser, λ = 660 ± 2 nm, with output power equal to 100 mW and beam area of 0,04 cm2– Therapy XT, DMC, São Carlos, Brazil), with irradiance of 32.7 mW/cm2 for 122 s, delivering a dose of 4 J/cm2. Euthanasia was done 15 days after the injury. Samples were routinely processed for paraffin inclusion and staining with hematoxylin and eosin, immunohistochemistry for SMA and VEGF. The vessels were counted using ImageJ software and the data analyzed statistically. There was no statistical difference between the number of VEGF-labeled blood vessels between the control and laser groups (p = 0.22 - Mann-Whitney test). The amount of mature pots labeled with SMA was also similar between the groups (p = 0.36 - Mann-Whitney Test). Under the study conditions, at 15 days of tissue repair of diabetic rats, photobiomodulation did not cause any difference in angiogenesisO diabetes mellitus (DM) é uma doença crônica causada tanto pela produção insuficiente de insulina quanto pela resistência periférica à mesma. Essa condição gera hiperglicemia com graves consequências, especialmente na cicatrização tecidual. Nesse contexto, o processo de formação de novos vasos, ou angiogênese, está bastante afetado. A fotobiomodulação (FBM) com laser em baixa intensidade tem sido relacionada a melhorias, tanto na angiogênese, como no reparo tecidual. Para entender parte desses mecanismos de FBM em animais diabéticos, esse trabalho avaliou se a FBM causa diferença na expressão de fator de crescimento do endotélio vascular (VEGF) e vasos maduros que expressam actina de músculo liso (SMA) em feridas cutâneas. Foram utilizados 10 ratos Wistar provenientes do biotério da UNINOVE. O diabetes foi induzido com estreptozotocina (50 mg/kg) e quinze dias após a indução os animais convertidos foram anestesiados e foram feitas duas úlceras dorsais com punch de 8 mm. Os animais foram aleatoriamente divididos em 2 grupos: Controle (úlcera sem tratamento), Laser (laserterapia logo após a realização da úlcera usando laser de diodo, λ= 660 ± 2 nm, com potência de saída igual a 100 mW e área do feixe de 0,04 cm2–Therapy XT, DMC, São Carlos, Brasil), com irradiância de 32,7 mW/cm2 durante 122 s, entregando uma dose de 4 J/cm2. A eutanásia foi feita 15 dias após a lesão. As amostras foram processadas rotineiramente para inclusão em parafina e coloração com hematoxilina e eosina, imunohistoquímica para SMA e VEGF. Os vasos foram contados com auxílio do software ImageJ e os dados analisados estatisticamente. Não houve diferença estatística entre a quantidade de vasos sanguíneos marcados com VEGF entre os grupos controle e laser (p=0,22 - Mann-Whitney). A quantidade de vasos maduros marcados com SMA também foi semelhante entre os grupos (p=0,36). Nas condições do estudo, aos 15 dias de reparo tecidual de ratos diabéticos, a fotobiomodulação não causou diferença na angiogênese.Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2022-04-08T19:56:53Z No. of bitstreams: 1 Amanda Pires de Souza.pdf: 2549732 bytes, checksum: 9fa06c13004df6c94d5ae1cd28823f95 (MD5)Made available in DSpace on 2022-04-08T19:56:53Z (GMT). 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