Análise dos efeitos da fotobiomodulação na viabilidade e características de celulas-tronco de câncer de linhagens celulares derivadas de carcinoma epidermóide de boca
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Data de Publicação: | 2019 |
Tipo de documento: | Dissertação |
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Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Uninove |
Texto Completo: | http://bibliotecatede.uninove.br/handle/tede/2606 |
Resumo: | The oral squamous cell carcinoma (OSCC) have a subpopulation of cells, termed as cancer stem cells (CSC), responsible for tumor growth, metastasis and therapeutic resistance. OSCC treatment may promote the development of oral mucositis, characterized by an inflammation with severe symptomatology. Photobiomodulation (PBM) is a tool for treatment and prevention of oral mucositis, however, the use of PBM remains controversy as it could promote tumor progression by acting in neoplastic cells, including the CSC, that could be remained in the tissue after treatment. Thus, the aim of this study is to evaluate in vitro the cellular viability and CSC characteristics in cell lines derived from OSCC after PBM using the clonogenic and sphere formation assay as well as flow cytometry to investigate the expression of CD44 and ESA. This study results show that the cellular viability and cellular autophagy results vary in relation to the irradiation frequency, the groups exposed to a single irradiation presented tumoral progression, the LED1+3J/cm² group presented raise of cellular viability trough MTT and VN assays, as well reduction of arbritary autophagy units. However, the promotion was inhibited when the cells were exposed daily, where LED3+3J/cm² and LED3+6J/cm² groups did not promote the cellular viability. The 6J/cm² group presented a cellular viability reduction profile. No change in gene relationed to stem cell fenotype, epithelial mesenchymal transition and cellular differentiation was observed. No alteration in the cellular populations marked with CD44/ESA was observed. A reduction in sphere formation was observed for the LED3 groups. The parameters used for clinical practice were not capable of promoting the cellular viability of tumoral cell lines, nor favor the stem cell fenotype. |
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OSCC treatment may promote the development of oral mucositis, characterized by an inflammation with severe symptomatology. Photobiomodulation (PBM) is a tool for treatment and prevention of oral mucositis, however, the use of PBM remains controversy as it could promote tumor progression by acting in neoplastic cells, including the CSC, that could be remained in the tissue after treatment. Thus, the aim of this study is to evaluate in vitro the cellular viability and CSC characteristics in cell lines derived from OSCC after PBM using the clonogenic and sphere formation assay as well as flow cytometry to investigate the expression of CD44 and ESA. This study results show that the cellular viability and cellular autophagy results vary in relation to the irradiation frequency, the groups exposed to a single irradiation presented tumoral progression, the LED1+3J/cm² group presented raise of cellular viability trough MTT and VN assays, as well reduction of arbritary autophagy units. However, the promotion was inhibited when the cells were exposed daily, where LED3+3J/cm² and LED3+6J/cm² groups did not promote the cellular viability. The 6J/cm² group presented a cellular viability reduction profile. No change in gene relationed to stem cell fenotype, epithelial mesenchymal transition and cellular differentiation was observed. No alteration in the cellular populations marked with CD44/ESA was observed. A reduction in sphere formation was observed for the LED3 groups. The parameters used for clinical practice were not capable of promoting the cellular viability of tumoral cell lines, nor favor the stem cell fenotype.O carcinoma epidermóide de boca (CEB), contém uma população de células denominadas células-tronco de câncer (CTC), responsáveis por sustentar o crescimento tumoral, desenvolvimento de metástases bem como resistência à terapia. O tratamento do CEB pode promover o desenvolvimento da mucosite oral, caracterizada por uma inflamação com intensa sintomatologia dolorosa. A fotobiomodulação (FBM) é utilizada para o tratamento e prevenção da mucosite oral, entretanto, existe controvérsia em relação ao uso desta ferramenta terapêutica em pacientes com CEB, uma vez que a mesma poderia atuar favorecendo a progressão tumoral ao atuar em células neoplásicas, incluindo as CTC que possam ter permanecido no local após o tratamento. Desta maneira, este estudo teve como objetivo avaliar in vitro a viabilidade celular e as características de CTC de linhagens celulares derivadas de CEB após a FBM com parâmetros dosimétricos utilizados para o tratamento da mucosite, por meio dos ensaios de formação de colônias, esferas e citometria de fluxo para os marcadores de superfície celular CD44 e ESA. Dentre os resultados obtidos, a viabilidade celular e autofagia celular viariaram em relação à frequência de irradiações, os grupos expostos a uma única irradiação apresentaram perfil de promoção tumoral, o grupo LED1+3J/cm² apresentou aumento de viabilidade pelos ensaios de MTT e VN, bem como redução de unidade arbritárias de autofagia, contudo, o aumento foi inibido quando as células foram expostas a irradiações diárias, onde LED3+3J/cm² e LED3+6J/cm² não promoveram o aumento de viabilidade celular. O grupo 6J/cm² apresentou um perfil inibitório de viabilidade celular. Não foram observadas alterações nos genes relacionados com fonotipo tronco, transição epitélio-mesenquimal e diferenciação celular. Não foram observadas alretações nas populações celulares CD44/ESA. Foi observada redução em formação de esferas para os grupos LED3. Os parâmetros dosimétricos que mais se aproximam da prática clínica, não foram capazes de aumentar a viabilidade das células tumorais nem favorecer o fenótipo tronco.Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2021-10-22T19:27:21Z No. of bitstreams: 1 Ana Melissa Ccopa Ibarra.pdf: 1937550 bytes, checksum: 74b081ea6129b45ad03f63bd15c2c40d (MD5)Made available in DSpace on 2021-10-22T19:27:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Melissa Ccopa Ibarra.pdf: 1937550 bytes, checksum: 74b081ea6129b45ad03f63bd15c2c40d (MD5) Previous issue date: 2019-01-01application/pdfporUniversidade Nove de JulhoPrograma de Pós-Graduação em Biofotônica Aplicada às Ciências da SaúdeUNINOVEBrasilSaúdefotobiomodulaçãoLLLTLEDcélulas tronco de câncerphotobiomodulationLLLTLEDcancer stem cellsCIENCIAS DA SAUDEAnálise dos efeitos da fotobiomodulação na viabilidade e características de celulas-tronco de câncer de linhagens celulares derivadas de carcinoma epidermóide de bocainfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis8765449414823306929600info:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Uninoveinstname:Universidade Nove de Julho (UNINOVE)instacron:UNINOVEORIGINALAna Melissa Ccopa Ibarra.pdfAna Melissa Ccopa Ibarra.pdfapplication/pdf1937550http://localhost:8080/tede/bitstream/tede/2606/2/Ana+Melissa+Ccopa+Ibarra.pdf74b081ea6129b45ad03f63bd15c2c40dMD52LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82165http://localhost:8080/tede/bitstream/tede/2606/1/license.txtbd3efa91386c1718a7f26a329fdcb468MD51tede/26062021-10-22 17:27:21.301oai:localhost: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Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://bibliotecatede.uninove.br/PRIhttp://bibliotecatede.uninove.br/oai/requestbibliotecatede@uninove.br||bibliotecatede@uninove.bropendoar:2021-10-22T19:27:21Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Uninove - Universidade Nove de Julho (UNINOVE)false |
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