Síntese de nitrosotióis para experimentação ex vivo e in vivo relacionada com a resistência à insulina

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Frade, Kelly Stefany Tuna
Data de Publicação: 2013
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.26/14152
Resumo: Dissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Superior de Ciências da Saúde Egas Moniz
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spelling Síntese de nitrosotióis para experimentação ex vivo e in vivo relacionada com a resistência à insulinaCadeia A nitrosiladaCadeia B nitrosiladaHISSPDIDissertação para obtenção do grau de Mestre no Instituto Superior de Ciências da Saúde Egas MonizO presente projeto de investigação pretende propor que a Substância Hepática Sensibilizadora de Insulina (HISS) consiste num dos produtos de degradação da insulina (cadeia A/B) nitrosilados, e que a enzima interveniente na formação de tais produtos é a Proteína Dissulfito Isomerase (PDI) presente nos hepatócitos. Adicionalmente sugere-se a ligação dos nitrosilados de insulina à albumina. Com vista a tentar comprovar esta hipótese, a investigação efetuada teve o intuito de confirmar a existência de PDI ao nível dos hepatócitos, determinar a sua atividade e analisar os produtos de degradação originados. Outro dos objetivos foi efetuar a produção de nitrosotióis de cadeia A e B para posterior administração ex vivo e in vivo, e respetiva quantificação do potencial terapêutico. Neste sentido, foram realizados diversos ensaios. Assim, numa fase inicial procedeu-se à monitorização da degradação enzimática da insulina por via in vitro com recurso à PDI purificada e a lisados de hepatócitos de rato recorrendo à técnica de turbidimetria. Seguidamente, foi realizada a análise dos produtos originados pela degradação da insulina efetuada pela PDI purificada através de eletroforese SDS-PAGE. Posteriormente, procedeu-se à separação química da cadeia A e B da insulina com posterior produção de nitrosotióis. Por último, estes produtos foram administrados a miotubos de rato e a ratos Wistar e o seu potencial terapêutico quantificado através da medição da captação de 2-deoxi-glucose marcada com trítio radioativo e através de sucessivos testes RIST, respetivamente. Com efeito, os resultados desta investigação permitiram reforçar as ilações feitas pelos demais autores quanto à presença e atividade da PDI ao nível dos hepatócitos em relação à insulina, e para além disso confirmaram a suspeita inicial de que um dos derivados de insulina nitrosilados tem potencial efeito terapêutico ao nível da resistência à insulina apesar de não parecer estar relacionado com a estrutura da HISS.Caldeira, Francisco JorgeRepositório ComumFrade, Kelly Stefany Tuna2016-06-21T15:50:45Z2013-10-01T00:00:00Z2013-10-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.26/14152201183153porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2022-10-06T14:52:22Zoai:comum.rcaap.pt:10400.26/14152Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T15:08:01.628406Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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