Avaliação do impacto biótico dos antimicrobianos em isolados clínicos obtidos em infecões polimicrobianas
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10400.14/36692 |
Resumo: | Apesar das infeções polimicrobianas serem bastante comuns, o seu estudo encontra-se ainda numa fase muito embrionária. Nestas infeções, e particularmente quando há formação de biofilmes, os microrganismos estabelecem uma rede complexa de interações que podem variar entre o antagonismo e a sinergia. Estas interações desempenham um papel importante na severidade e progressão da doença, com consequências na virulência, na eficiência da resposta imunitária e na eficácia do tratamento com antibióticos. Numa era em que a resistência a antimicrobianos é um cenário alarmante e em rápida expansão, a escolha do tratamento adequando é fundamental e tem consequências na prevenção, na disseminação e no desenvolvimento de resistências. O presente trabalho teve como objetivo estudar interações entre pares de estirpes coisoladas em amostras clínicas veterinárias, tanto na fase plantónica como em biofilmes. Os estudos foram conduzidos para células cultivadas isoladamente e em cocultura. Para células na fase plantónica foi avaliada a viabilidade celular por métodos dependentes de cultura, enquanto o número células totais e a morfologia foram avaliados por FISH. Foi estudada a capacidade de formação de biofilme através da quantificação da biomassa total e da matriz, tendo sido também avaliada a viabilidade celular através da quantificação da atividade metabólica e marcação Live/Dead. Todo este conjunto de técnicas foi aplicado progressivamente com o intuito de identificar alterações marcantes na morfologia e na viabilidade das espécies microbianas, concentrando os estudos em torno dos pares e das concentrações antibióticas inibitórias em que se observavam as alterações mais significativas. Foi possível concluir que em cocrescimento, na presença de uma cefalosporina, a estirpe mais sensível foi beneficiada em detrimento da mais resistente, que era produtora de um mecanismo de resistência enzimático. A viabilidade da estirpe mais sensível, quando exposta a concentrações superiores à sua concentração mínima inibitória, aumenta comparativamente à sua cultura isolada. |
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Avaliação do impacto biótico dos antimicrobianos em isolados clínicos obtidos em infecões polimicrobianasInfeções polimicrobianasBiofilmesAntimicrobianosCefalosporinasPolymicrobial infectionsBiofilmsAntimicrobial drugsCephalosporinsDomínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e TecnologiasApesar das infeções polimicrobianas serem bastante comuns, o seu estudo encontra-se ainda numa fase muito embrionária. Nestas infeções, e particularmente quando há formação de biofilmes, os microrganismos estabelecem uma rede complexa de interações que podem variar entre o antagonismo e a sinergia. Estas interações desempenham um papel importante na severidade e progressão da doença, com consequências na virulência, na eficiência da resposta imunitária e na eficácia do tratamento com antibióticos. Numa era em que a resistência a antimicrobianos é um cenário alarmante e em rápida expansão, a escolha do tratamento adequando é fundamental e tem consequências na prevenção, na disseminação e no desenvolvimento de resistências. O presente trabalho teve como objetivo estudar interações entre pares de estirpes coisoladas em amostras clínicas veterinárias, tanto na fase plantónica como em biofilmes. Os estudos foram conduzidos para células cultivadas isoladamente e em cocultura. Para células na fase plantónica foi avaliada a viabilidade celular por métodos dependentes de cultura, enquanto o número células totais e a morfologia foram avaliados por FISH. Foi estudada a capacidade de formação de biofilme através da quantificação da biomassa total e da matriz, tendo sido também avaliada a viabilidade celular através da quantificação da atividade metabólica e marcação Live/Dead. Todo este conjunto de técnicas foi aplicado progressivamente com o intuito de identificar alterações marcantes na morfologia e na viabilidade das espécies microbianas, concentrando os estudos em torno dos pares e das concentrações antibióticas inibitórias em que se observavam as alterações mais significativas. Foi possível concluir que em cocrescimento, na presença de uma cefalosporina, a estirpe mais sensível foi beneficiada em detrimento da mais resistente, que era produtora de um mecanismo de resistência enzimático. A viabilidade da estirpe mais sensível, quando exposta a concentrações superiores à sua concentração mínima inibitória, aumenta comparativamente à sua cultura isolada.Even though polymicrobial infections are very common, their study is still at an early stage. In these infections, particularly when biofilms are formed, microorganisms establish a complex network of interactions that can change between antagonism and synergism. These interactions play an important role in the severity and progression of disease, with consequences in virulence, in the the immune response and in the effectiveness of antimicrobial therapy. In an era in which resistance to antimicrobials is an alarming and rapidly expanding scenario, the choice of appropriate treatment is paramount, with consequences in preventing the development and spreading of resistances. The aim of this work was to study the biotic interactions between bacterial strains isolated from veterinary clinical samples, both in the planktonic state and in biofilms. The studies were conducted for single-species or dual-species combinations. The viability of cells in the planktonic phase was determined by culture-dependent methods, whilst total cell counts and cell morphology were assessed with FISH. The biofilm-forming capacity of the tested strains was quantified, as well as their matrix production. Cellular viability was evaluated through metabolic activity quantification and Live/Dead staining. All these methods were used progressively, in order to identify changes in morphology and cell viability, and thus focusing our work in co-isolated strains and inhibitory concentrations in which the most significant changes were detected. In this study, we showed that co-culturing two strains in the presence of a cephalosporin benefits the most sensitive one rather than the resistant one. The viability of the most sensitive strain at concentrations higher than its minimum inhibitory concentration increased in comparison to its response alone.Costa, Paulo Manuel Rodrigues Martins daInácio, Ângela Rosalina SanchesVeritati - Repositório Institucional da Universidade Católica PortuguesaSilva, Joana Manuela Machado Freitas da2022-02-15T11:55:33Z2018-01-292017-102018-01-29T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.14/36692TID:202728013porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-07-12T17:42:09Zoai:repositorio.ucp.pt:10400.14/36692Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T18:29:49.579576Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
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