Cytotoxic effect of sulforaphane in human osteosarcoma cells

• Autor(a) principal: Remédios, Catarina Fortuna dos
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/10874
• topic: Citologia; Citotoxicidade; Doenças dos ossos - Cancro; Ciclo celular; Apoptose; Expressão genética

O osteossarcoma é o tipo mais comum de tumor maligno do osso. Esta doença apresenta uma elevada incidência em crianças e adolescentes. Adicionalmente, metástases, ocorrendo principalmente nos pulmões, afectam uma percentagem considerável dos pacientes com osteossarcoma. Os tratamentos actuais incluem ressecção cirúrgica, quimioterapia e radioterapia, mas os pacientes com osteossarcoma apresentam uma baixa capacidade de resposta a estas opções de tratamento. Assim, é urgente desenvolver novas abordagens de tratamento. O sulforafano é um fitocomposto que exibe actividade quimiopreventiva e quimioterápica. Numerosos estudos têm demonstrado que o sulforafano modula muitos eventos associados ao cancro, como susceptibilidade a agentes carcinogénicos, ciclo celular, apoptose, angiogénese e metastização. Apesar de bem caracterizados em diversos tumores, os efeitos do sulforafano são ainda insuficientemente conhecidos no osteossarcoma, assim como o mecanismo de acção subjacente. O objectivo desta dissertação foi avaliar os potenciais efeitos citostático e apoptótico do sulforafano e revelar o mecanismo de acção por trás destes efeitos. Para isso, a linha celular de osteossarcoma humano MG-63 foi exposta a sulforafano (no intervalo de 0 a 20 μM) durante 24 e 48 h. Parâmetros como confluência, morfologia celular, viabilidade celular, ciclo celular, clastogenicidade, apoptose, actividade específica de caspases e expressão de genes associados ao ciclo celular foram analisados após o tratamento com sulforafano. As culturas expostas ao sulforafano apresentaram uma diminuição da confluência, acompanhada de alterações na morfologia celular. O sulforafano também induziu uma diminuição da viabilidade celular dependente da dose e do tempo de exposição que pode ser explicada pelo aumento de células apoptóticas e por citostaticidade com bloqueio na fase G2/M. Este bloqueio do ciclo celular foi mediado por Chk2, pela sub-expressão de CDC25C e, provavelmente, pela sub-expressão de CCNB1, assim como de CDK2. Um efeito clastogénico foi também detectado após 48 h de tratamento com sulforafano. Estes dados sugerem que o sulforafano deve ser considerado um candidato a agente quimioterápico no tratamento de osteossarcoma, embora sejam necessários mais estudos para lançar luz sobre vias de sinalização moduladas pelo sulforafano, assim como sobre a possível citotoxicidade deste fitocomposto em osteoblastos normais.