Desenvolvimento de um biossensor eletroquímico para monitorização da radioterapia no melanoma

• Autor(a) principal: Cerqueira, Sofia Manuela Vasconcelos
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.22/15734
• topic: Biossensor; Gal-3; Melanoma; Polímeros de impressão molecular; Biosensor; Molecularly-imprinting polymers

A incidência do cancro da pele em Portugal continua a ser preocupante em relação à média europeia. No que diz respeito ao melanoma, apesar de representar apenas 4% de todos os cancros da pele, representa a forma mais agressiva, devido ao seu elevado potencial de metastização, sendo responsável por cerca de 75% das mortes que estão associadas às neoplasias cutâneas. Alguns estudos demonstraram que a expressão da galactina-3 (Gal-3) estava associada à progressão do melanoma, pelo que poderá ser usada como um marcador da monitorização da eficácia terapêutica, como por exemplo da radioterapia. Adicionalmente, a Gal-3 tem revelado uma enorme versatilidade diagnóstica, tendo sido demonstrada a sua importância como biomarcador em diversos tipos de cancro, em doenças cardíacas e mais recentemente em distúrbios metabólicos como a diabetes. Neste sentido, este trabalho tem como objetivo o desenvolvimento e a otimização de um biossensor eletroquímico com base em polímeros de impressão molecular (do inglês, molecularly-imprinted polymer, MIP) para a monitorização do efeito da radioterapia no melanoma, através da deteção da Gal-3. O reconhecimento da molécula alvo foi feita através de um material MIP, criado na superfície do elétrodo por eletropolimerização da mistura do analito (Gal-3) com o monómero (2-Aminofenol). Este processo formou então um polímero não condutor com locais de reconhecimento, demonstrando afinidade para a Gal-3. Posteriormente, a proteína foi removida por um tratamento com ácido oxálico. O controlo da modificação da superfície foi feito por espetroscopia de RAMAN e por técnicas eletroanalíticas, nomeadamente a espetroscopia de impedância eletroquímica (do inglês, electrochemical impedance spectroscopy, EIS) e a voltametria cíclica (do inglês, cyclic voltammetry, CV). A avaliação do desempenho analítico do sensor foi feita por EIS seguindo a resposta obtida com soluções padrão entre os 0,5 ng/mL e 5 ng/mL de Gal-3. A resposta obtida foi de interesse analítico, considerando que indivíduos saudáveis apresentam um nível fisiológico normal de 30 ng/mL. De uma forma geral, o biossensor apresentou um bom desempenho analítico geral em termos de limite de deteção, tempo de resposta e reprodutibilidade. As características de desempenho do material MIP em soro foram também adequadas, considerando possíveis aplicações posteriores em amostras reais, revelando um reduzido impacto dos vários componentes deste fluído na resposta do biossensor. Face ao exposto, o biossensor desenvolvido com base em anticorpos plásticos (MIP´s) como elemento de biorreconhecimento, mostrou características relevantes em termos de simplicidade e sensibilidade, demonstrando um grande potencial para a aplicação no local em pesquisa médica e diagnóstico clínico.