Desenvolvimento de um anticorpo plástico para a deteção potenciométrica de um biomarcardor da doença de Alzheimer

• Autor(a) principal: Ribeiro, Sónia Cláudia Silva
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.22/11234
• topic: Doença de alzheimer; biossensores; biomarcador; β-amiloide

A presente dissertação descreve o desenvolvimento de um dispositivo que se pretende que contribua para o diagnóstico da Doença de Alzheimer point-of-care, construído com base na preparação de um novo material biomimético e na sua incorporação em membranas poliméricas de poli(cloreto de vinilo), PVC, plastificado para subsequente deteção potenciométrica. Para este estudo foi considerado o biomarcador de interesse clínico convencional no contexto da Doença de Alzheimer (DA), o péptido -Amiloide 42 (Aβ42). O material biomimético foi preparado por ligação do péptido (Aβ-42) a uma superfície com nanotubos de carbono, seguindo-se de um pré-arranjo monomérico com monómeros de carga positiva. A mistura reacional utilizada para polimerização continha acrilamida 5,0×10-4 mol/L (monómero), N,N'-metilenobisacrilamida 1,0×10-4 mol/ L (reticulante) e persulfato de amónio (iniciador). O biomarcador foi removido da matriz polimérica por ação proteolítica da proteinase K. O material biomimético preparado foi aplicado na construção de sensores potenciométricos e testado relativamente à sua afinidade e seletividade de ligação ao péptido Aβ-42, por avaliação do desempenho analítico dos elétrodos resultantes. Para este efeito, o material biomimético foi disperso em membranas de PVC plastificado, que continham ou não um aditivo iónico lipofílico, e aplicado em suporte condutor sólido. A análise morfológica do biossensor foi avaliada por RAMAN e Espetroscopia de Infravermelho com transformada de Fourrier (FTIR). O desempenho analítico foi avaliado inicialmente em meio tampão e posteriormente em soro humano. As melhores características de resposta analítica foram obtidas com membranas preparadas com material impresso e com aditivo catiónico, brometo de tetraoctilamónio. O valor médio do limite de deteção (LD) foi 0,72µg/mL e o declive +59,04 mV/década. O biossensor foi aplicado com sucesso na análise preliminar de amostras de soro humano.