Changes in lipidomic profile induced by lipopolysaccharide and skin sensitizer in dendritic cells and keratinocytes

• Autor(a) principal: Santinha, Deolinda da Conceição Ribafeita
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10316/31379
• topic: Dermatite de contacto alérgica; Células dendríticas; Queratinócitos; Lipopolissacaridos; Espectroscopia de massas

A Dermatite de Contacto Alérgica, uma das doenças ocupacionais mais comuns, é a patologia resultante de uma resposta imune alérgica após a exposição cutânea a um grande subconjunto de químicos. Actualmente, o potencial sensibilizador cutâneo de químicos é apenas avaliado através de testes in vivo que utilizam animais. Contudo, face à legislação europeia em vigor, que impõe a adopção de novas abordagens, é imperativo desenvolver testes in vitro alternativos e eficazes para a avaliação da sensibilização cutânea. O objectivo deste estudo foi identificar o perfil lipídico de células dendríticas (DCs) e queratinócitos (KCs) e avaliar as alterações que ocorrem no seu perfil após a exposição ao potente estímulo pró-inflamatório, o lipopolissacarídeo (LPS), e ao forte sensibilizador cutâneo (DNFB), a fim de demonstrar o papel dos lípidos e as alterações lipídicas que ocorrem durante a maturação das DCs e identificar bons biomarcadores para posteriormente usar numa abordagem in vitro alternativa. O perfil lipídico foi avaliado por espectrometria de massa, usando uma abordagem lipidómica, que combina TLC e posterior análise por ESI-MS e ESI-MS/MS. Os resultados obtidos neste estudo permitem observar que durante a maturação DC e após exposição ao alergénio ocorrem alterações no conteúdo total de ceramidas e no seu perfil, ocorrendo um aumento das ceramidas C16, C24:1 e C24:0. A identificação e caracterização das alterações lipídicas desencadeadas pelo LPS e sensibilizador cutâneo nos KCs revelam modificações importantes no conteúdo total de fosfatidilserinas e alterações no seu perfil, promovendo uma drástica redução numa das mais abundantes fosfatidilserinas presentes nos queratinócitos, PS(16:0/18:1 ou 16:1/18:0). O padrão de alteração destes lípidos fornece uma fonte extremamente rica de informação para avaliar a modulação de espécies específicas de lípidos induzida pela exposição das DCs e KCs a um sensibilizador cutâneo e ao LPS, que pode ser integrado numa estratégia com vista à redução do uso de animais para avaliar o potencial de sensibilização cutânea.