Caracterização fenótipica e funcional de subpopulações de linfócitos T CD8+ em sangue periférico e líquido sinovial de doentes de artrite reumatóide e quantificação de citocinas e quimiocinas no soro desses doentes

• Autor(a) principal: Cardoso, Sandra Cristina Silva
• Data de Publicação: 2011
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10198/6809

A Artrite Reumatóide (AR) é caracterizada por inflamação sistémica, sinovite e presença de auto-anticorpos (tal como o factor reumatóide -FR e proteínas citrulinadas). Esta patologia provoca lesões articulares, deficiências, diminuição da qualidade de vida, e doenças vasculares. Os Medicamentos Anti-reumáticos Modificadores da Doença, DMARD (Disease-Modifying Antirheumatic Drugs), tal como o Metotrexato (MTX) são agentes terapêuticos que podem reduzir os sintomas desta doença. Os linfócitos T CD8+, são células efectoras chave da resposta imune adquirida, contudo a sua actividade deve ser regulada de forma a permitir a eliminação eficiente dos patogénios e prevenir fenómenos de autoimunidade. De forma a compreender o papel os linfócitos T CD8+ na AR foram estudadas as alterações da frequência das suas subpopulações no Sangue Periférico (SP) e no Líquido Sinovial (LS) de doentes com essa patologia (com diferentes actividades da doença e presença ou ausência de terapia com MTX), assim como as citocinas intracelulares libertadas por essa subpopulação de células através da técnica de Citometria de Fluxo (CF). Foram igualmente estudadas as alterações dos níveis séricos de citocinas pró e anti-inflamatórias através de um imunoensaio baseado numa aplicação da CF baseada em microesferas, CBAs (Cytometric Bead Array). No nosso trabalho de investigação encontrámos alterações significativas das subpopulações de células T CD8+CD69+ (fenótipo de células activadas) nos doentes de AR. Concluímos que estas caracterizam a presença e o estado de actividade da doença, sendo um indicador directo da actividade da doença nos locais de inflamação. Desta forma consideramos que a análise da frequência desta subpopulação no SP dos doentes de AR permite confirmar um prognóstico da doença. Tendo em conta que a presença da subpopulação de células T CD8+ de Memória Efectora (com fenótipo CD27+CD62L-CCR7-) está correlacionada entre SP e LS de doentes de AR, podemos concluir que a partir de um screening feito no SP desses doentes obtenhamos informação sobre o comportamento dessa subpopulação celular no LS. A quantificação de citocinas e quimiocinas a partir do soro de doentes de AR veio, mais uma vez, demonstrar a importância destas nos mecanismos inflamatórios. Por um lado, proteínas com acção pró-inflamatória como a IL-10 e de recrutamento de células leucocitárias polimorfonucleares de fase aguda, como a MIP-1α estão diminuídas na AR. Por outro lado, quimiocinas como a MCP-1, MIP-1β, MIG e IL-8, que embora sejam sintetizadas por diferentes subpopulações têm o papel de recrutar células para o processo inflamatório e algumas também se encontram envolvidas na reparação de tecidos danificados, estão aumentadas nos doentes com a mesma patologia. Desta forma, concluímos que estas proteínas são importantes factores na manifestação e cronicidade desta patologia. A terapêutica por administração de MTX aos doentes de AR demonstrou causar alterações nas subpopulação de células T CD8+ de Memória Central (aumento significativo), de Memória Efectora (diminuição significativa) e nas subpopulações de células T CD8+ que libertam IL-17 (diminuição significativa). Estes resultados levam-nos a sugerir que um dos mecanismos de acção do MTX é feito sobre essas subpopulações de linfócitos T CD8+. Concluímos que várias subpopulações de linfócitos T CD8+ estudadas têm um impacto significativo no estabelecimento e permanência desta patologia crónica, o que estimulou interesse para desenvolver futuramente um possível diagnóstico para a AR a partir do conhecimento que produzimos relativamente ao papel dos linfócitos T citotóxicos (CTLs) nessa patologia, assim como uma nova terapêutica biológica direccionada para a acção desses linfócitos.