Identificação de um potencial biomarcador de malária

• Autor(a) principal: Vieira, Tiago Filipe Mota
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/19561
• topic: Malária; Biomarcador; Electroforese bidimensional; Espectrometria de massa; Análise proteómica; Domínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Engenharia Química

Em 2015, estima-se tenham existido entre 149-303 milhões casos de malária, e mortes associadas entre 236 000-635 000. A infeção é causada por parasitas do género Plasmodium, particularmente a espécie P. falciparum. O diagnóstico apropriado aumentou bastante desde 2005, principalmente devido aos testes diagnóstico rápido (RDTs). A sensibilidade destes RDTs apresenta variações significativas entre as populações onde a malária é considerada endémica. É urgente um RDT com elevada precisão, sensibilidade e custo reduzido, permitindo a deteção de níveis de parasitemia de 100 parasitas/μL, sendo a identificação de biomarcadores de malaria um factor-chave. Os objetivos deste projeto foram: 1) optimização do protocolo de separação proteínas de amostras de soro humano, via electroforese bidimensional (2-DE), e 2) identificação de antigénios específicos de parasitas de malária (biomarcadores) em amostras infetadas pelo Plasmodium. A estratégia focou-se na depleção de albumina, a proteína sérica humana mais abundante, conseguida pela utilização de membranas com um limite de exclusão molecular de 50 kDa, lavadas em solução de tampão fosfato de sódio. As restantes proteínas foram separadas através de 2-DE. Foi comparado o padrão proteico das amostras de indivíduo saudável (controlo), com as de indivíduos com infeções ativas de malária ou com historial clínico desta infeção. Proteínas apenas expressas nestas amostras, ou com variações específicas nos seus níveis de expressão são potenciais biomarcadores desta doença, identificadas por MS. Foram identificadas sete proteínas com variações significativas nos níveis de expressão, duas apenas identificadas nas amostras infetadas e nove spots proteicos com variações significativas na sua expressão (não identificadas por MS). Neste projeto foram identificadas proteínas a utilizar como biomarcadores no diagnóstico de malária, com o objetivo de controlar e erradicar globalmente esta infeção