Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicine

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Morais, Inês Marques
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10316/89595
Resumo: Dissertação de Mestrado em Investigação Biomédica apresentada à Faculdade de Medicina
id RCAP_1f7853166291c80a45a14240d1b6e18c
oai_identifier_str oai:estudogeral.uc.pt:10316/89595
network_acronym_str RCAP
network_name_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository_id_str 7160
spelling Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicineVesículas extracelulares da urina: uma ferramenta promissora para medicina regenerativaEnfarte agudo do miocárdiovesículas extracelularesmicroRNAscélulas endoteliaisurinaAcute myocardial infarctionextracellular vesiclesmicroRNAsendothelial cellsurineDissertação de Mestrado em Investigação Biomédica apresentada à Faculdade de MedicinaAs doenças cardiovasculares (DCV) permanecem a principal causa de morte a nível global. Apesar de uma significativa melhoria em prevenção e no desenvolvimento de novas terapias, o número total de mortes devido as DCVs aumentaram em 12,5% na última década. Este aumento é devido a fatores de risco individuais, como o sedentarismo, abuso de álcool e/ou outras substâncias. No geral a combinação destes fatores pode levar à ocorrência de um enfarte agudo do miocárdio (EAM).Um EAM é caracterizado por redução ou bloqueio de perfusão no miocárdio, culminando, eventualmente em morte celular irreversível devido as condições isquémicas. De maneira a minimizar o dano no coração, é essencial restabelecer o fluxo sanguíneo, no entanto, esta reperfusão leva a danos adicionais a um coração já danificado, este fenómeno é chamado de lesão de isquemia/reperfusão (I/R). Sendo assim, terapias inovadoras capazes de melhorar e/ou resolver estas complicações são necessárias.Vesiculas extracelulares (VEs) são importantes mediadores de comunicação celular. A sua composição, tanto na sua superfície como o seu conteúdo, retrata o estado da célula que os libertou, e VEs de diferentes origens celulares e até de diferentes fluidos biológicos são usados como biomarcadores e agentes terapêuticos. Presentemente, acredita-se que os principais componentes responsáveis por esta bioatividade nos EVs, são RNAs não codificantes, em particular microRNAs (miRNA).Numa primeira fase desta tese, testamos a bioatividade de VEs isolados de urina de pacientes que sofreram um EAM, em células endoteliais, e numa segunda parte, exploramos o papel de um novo miRNA, previamente identificado no nosso grupo como capaz de aumentar a sobrevivência em células endoteliais em condições de isquemia. Para entregar este miRNA de interesse (a partir de agora, denominado miR-B) nas células de interesse, exploramos duas estratégias: complexação do miRNA com uma lipídica formulação comercial (lipofectamina RNAiMAX) e complexação do miRNA com VEs isolados de urine de dadores saudáveis. Em última análise, testamos estas abordagens na sobrevivência de células endoteliais expostas a condições isquémicas e mostramos que os VEs-modulados com miRNA eram mais eficazes em aumentar a sobrevivência endotelial do que a lipofectamina. Com estes resultados, concluímos que o miR-B aumenta a sobrevivência de células endoteliais expostas a condições de isquemia e que os VEs de dadores saudáveis serviram como o veículo ideal para a entrega do miRNA às células.Cardiovascular diseases (CVD) remain the leading cause of death globally. Despite significant improvements in prevention and in the development of novel therapeutic strategies, the total number of deaths due to CVD has increased 12.5% in the past decade. This increase is likely due to individual risk factors, like physical inactivity, alcohol and/or other substances abuse as well as environmental factors such as pollution. Overall, the combination of these factors can ultimately lead to an acute myocardial infarction (AMI).An AMI is characterized by a reduction or blockage of myocardial perfusion, eventually culminating in irreversible cell death due to the ischemic conditions that ensue. To minimize the damage to the heart, it is essential to restore the blood flow as quickly as possible. However, this reperfusion will lead to additional harm to the already injured heart, a phenomenon known as ischemia/reperfusion injury. Thus, novel therapies capable of ameliorating and/or resolve these complications are much needed. Extracellular vesicles (EVs) are important mediators of intercellular communication. Their composition, both the surface as well as the cargo, portray the state and composition of the releasing cell, and EVs from many different cellular origins and from different biological fluids have been used as biomarkers and/or therapeutic agents. Currently, it is believed that the major components driving the bioactivity of EVs are non-coding RNAs, in particular microRNAs (miRNA). In the first part of this thesis we tested the bioactivity of EVs isolated from urine of AMI patients in endothelial cells (ECs) and in the second part we explored the role of a novel miRNA, previously identified in our group as capable of enhancing the survival of EC in ischemic conditions. To deliver this miRNA of interest (from here on denoted miR-B) into the cells we explored two strategies: complexation of the miRNA with a commercial lipidic formulation (lipofectamine RNAiMax) and complexation of miRNA with EVs isolated from the urine of healthy donors. Ultimately, we tested these approaches on the survival of ECs exposed to ischemic conditions and showed that miRNA-modulated EVs were more effective on enhancing EC survival than lipofectamine. Based on the above-mentioned results, we concluded that miR-B enhances the survival of ECs exposed to ischemia and that urine EVs from healthy donors can be used as an effective vehicle to deliver miRNA into the cells.Outro - Este trabalho foi financiado pelo Programa Operacional Competividade e Internacionalização (POCI) na sua componente FEDER e pelo orçamento da Fundação para a Ciência e a Tecnologia na sua componente OE (Project “Exo-Heart”: POCI-01-0145-FEDER-029919) e Projeto europeu ERAatUC (ref. 669088).2019-09-06info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://hdl.handle.net/10316/89595http://hdl.handle.net/10316/89595TID:202476375engMorais, Inês Marquesinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-01-31T11:31:27Zoai:estudogeral.uc.pt:10316/89595Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T21:09:51.952327Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
dc.title.none.fl_str_mv Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicine
Vesículas extracelulares da urina: uma ferramenta promissora para medicina regenerativa
title Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicine
spellingShingle Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicine
Morais, Inês Marques
Enfarte agudo do miocárdio
vesículas extracelulares
microRNAs
células endoteliais
urina
Acute myocardial infarction
extracellular vesicles
microRNAs
endothelial cells
urine
title_short Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicine
title_full Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicine
title_fullStr Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicine
title_full_unstemmed Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicine
title_sort Urine extracellular vesicles: a promising tool in regenerative medicine
author Morais, Inês Marques
author_facet Morais, Inês Marques
author_role author
dc.contributor.author.fl_str_mv Morais, Inês Marques
dc.subject.por.fl_str_mv Enfarte agudo do miocárdio
vesículas extracelulares
microRNAs
células endoteliais
urina
Acute myocardial infarction
extracellular vesicles
microRNAs
endothelial cells
urine
topic Enfarte agudo do miocárdio
vesículas extracelulares
microRNAs
células endoteliais
urina
Acute myocardial infarction
extracellular vesicles
microRNAs
endothelial cells
urine
description Dissertação de Mestrado em Investigação Biomédica apresentada à Faculdade de Medicina
publishDate 2019
dc.date.none.fl_str_mv 2019-09-06
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10316/89595
http://hdl.handle.net/10316/89595
TID:202476375
url http://hdl.handle.net/10316/89595
identifier_str_mv TID:202476375
dc.language.iso.fl_str_mv eng
language eng
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron:RCAAP
instname_str Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron_str RCAAP
institution RCAAP
reponame_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
collection Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository.name.fl_str_mv Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1799133993564635136

Registros relacionados