Procedimentos e técnicas em laboratório de investigação médica em inflamação e osso

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Lopes, Ana Filipa Rodrigues
Data de Publicação: 2010
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.6/2309
Resumo: A Unidade de Investigação em Reumatologia do Instituto de Medicina Molecular promove investigação de translação e excelência no campo da Reumatologia. No estágio desenvolvido foram aplicadas várias técnicas utilizadas no quotidiano de um laboratório dedicado ao estudo de doenças inflamatórias e ósseas. Os objectivos deste trabalho prendem-se com questões de gestão laboratorial, aprendizagem de diversas técnicas laboratoriais e aplicação específica de algumas técnicas num projecto de investigação. Para o bom funcionamento de um laboratório de investigação é necessária uma gestão laboratorial de base na manutenção dos stocks e preparação do material necessário à realização das experiências bem como o correcto processamento e armazenamento das diversas amostras recebidas. No estudo de doenças reumáticas e ósseas, como a artrite reumatóide e a osteoporose, realizam-se estudos para analisar a expressão de genes de osteoblastos e osteoclastos importantes no processo de remodelação óssea. A quantificação de proteínas solúveis pode ser correlacionada com resultados da expressão génica, com a actividade da doença ou com alterações nos processos de reabsorção óssea. No que respeita à avaliação da qualidade óssea são utilizadas técnicas de imagiologia que permitem obter dados quantitativos e qualitativos relativos à microestrutura óssea, e que podem ser correlacionados com parâmetros biomecânicos. O estudo dos níveis de osteocalcina descarboxilada permite avaliar indirectamente a mineralização da matriz óssea. Neste estudo foram avaliados doentes com fractura do colo do fémur mas devido ao número limitado de amostras correlações dos resultados com a idade, o sexo ou densidade mineral óssea são difíceis de obter. Na perspectiva de obter resultados conclusivos e como trabalho futuro o estudo será alargado para um maior número de amostras e complementado com outras análises como a do polimorfismo da apolipoproteína E. Este estágio constituiu uma experiência muito enriquecedora que me permitiu crescer pessoal e profissionalmente, por ter colaborado com vários profissionais da área de investigação biomédica num instituto de excelência como o Instituto de Medicina Molecular.
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Para o bom funcionamento de um laboratório de investigação é necessária uma gestão laboratorial de base na manutenção dos stocks e preparação do material necessário à realização das experiências bem como o correcto processamento e armazenamento das diversas amostras recebidas. No estudo de doenças reumáticas e ósseas, como a artrite reumatóide e a osteoporose, realizam-se estudos para analisar a expressão de genes de osteoblastos e osteoclastos importantes no processo de remodelação óssea. A quantificação de proteínas solúveis pode ser correlacionada com resultados da expressão génica, com a actividade da doença ou com alterações nos processos de reabsorção óssea. No que respeita à avaliação da qualidade óssea são utilizadas técnicas de imagiologia que permitem obter dados quantitativos e qualitativos relativos à microestrutura óssea, e que podem ser correlacionados com parâmetros biomecânicos. O estudo dos níveis de osteocalcina descarboxilada permite avaliar indirectamente a mineralização da matriz óssea. Neste estudo foram avaliados doentes com fractura do colo do fémur mas devido ao número limitado de amostras correlações dos resultados com a idade, o sexo ou densidade mineral óssea são difíceis de obter. Na perspectiva de obter resultados conclusivos e como trabalho futuro o estudo será alargado para um maior número de amostras e complementado com outras análises como a do polimorfismo da apolipoproteína E. Este estágio constituiu uma experiência muito enriquecedora que me permitiu crescer pessoal e profissionalmente, por ter colaborado com vários profissionais da área de investigação biomédica num instituto de excelência como o Instituto de Medicina Molecular.The Rheumatology Research Unit of Instituto Medicina Molecular promotes excellence investigation in the field of rheumatology. During the training period in this unit several techniques used daily in a bone and inflammatory diseases laboratory were learned and applied. The objectives of this work were to learn and be familiarized with laboratorial management, several laboratory techniques, as well as their specific application in an investigation project. To ensure a proper functioning of a laboratory it’s necessary to have a laboratorial management in what concerns to stocks maintenance, preparation of the needed material to perform the experiments as well as the correct processing and storage of the several samples received. In the study of rheumatic or bone affecting diseases, such as rheumatoid arthritis and osteoporosis, gene expression studies to analyze the osteoblast and osteoclast function, which play a very important role in the bone regeneration process, need to be performed. Soluble proteins quantification can be correlated with gene expression results, with disease activity or with modifications in the bone resorption. In what concerns the evaluation of bone quality, imaging techniques allow the achievement of quantitative and qualitative data of the bone microstructure which can be correlated to biomechanical parameters. The study of decarboxilated osteocalcin levels enables the indirect evaluation of bone matrix mineralization. In this study, patients with femoral neck fracture were evaluated but due to the limited number of samples, correlations between the results and the age, gender or bone mineral density were difficult to obtain. In the perspective of getting conclusive results and as future work, the study will be extended to a bigger number of samples and complemented with other analysis as apolipoprotein E polymorphism analysis. This training period was an enriching experience which allowed me to grow both as a person and professionally by having worked with biomedical professional researchers in an excellence institute as Instituto de Medicina Molecular.Canhão, HelenaCorreia, Ilídio Joaquim SobreirauBibliorumLopes, Ana Filipa Rodrigues2014-09-23T09:05:29Z201020102010-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.6/2309porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-12-15T09:38:17Zoai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/2309Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T00:44:00.519564Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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