Microrreatores: uma ferramenta para a otimização de bioprocessos

• Autor(a) principal: Godinho, Bruno Miguel Marques
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/12604
• topic: Biotecnologia industrial; Microrreactores; Cinética enzimática; Lipases; Candida antarctica

O trabalho iniciou-se com uma pesquisa bibliográfica sobre os microrreatores, a sua aplicação em processos enzimáticos, suportes, tipos de imobilização enzimática e sínteses de ésteres em meios não convencionais catalisadas por lipases. A primeira fase laboratorial iniciou com a obtenção das melhores condições de imobilização de lipase B da Candida antarctica (CALB) em celulose bacteriana (CB), tendo como variáveis a concentração enzimática e o tempo de contacto entre a solução e a CB. Estas condições ótimas foram selecionadas para imobilização por adsorção e por ligação covalente. As condições escolhidas foram a concentração de 4mg/mL com um tempo de exposição de 4 horas. Numa segunda fase foi testada a estabilidade operacional das imobilizações em meio aquoso, através da atividade enzimática em vários ciclos de utilização (hidrólise p-nitrofenol). No teste de estabilidade foram distinguidos dois grupos de imobilizações: as armazenadas no frigorífico (4ºC) e as armazenadas no congelador (-18ºC) para ambos os tipos de imobilização. As imobilizações do congelador apresentaram melhor resistência operacional. Não foi notada uma diferença significativa entre os dois tipos de imobilização, embora a adsorção tenha sido melhor nos primeiros ciclos e a ligação covalente ligeiramente superior nos ciclos finais. Na parte final, usando a imobilização por adsorção, foi tentada, sem sucesso, a síntese de dois ésteres, nomeadamente o propil galato e o eugenil benzoato, por serem duas moléculas com grande potencial de aplicação nas indústrias farmacêutica e alimentar. No entanto foi possível encontrar um método simples e rápido de deteção e análise dos ésteres por FTIR usando padrões. Foi também possível constatar que o propil galato e ácido gálico podem ser rapidamente detetados por titulação com hidróxido de sódio (sem indicador extra) através das diferentes cores que apresentam, amarelo e verde respetivamente.