Mecanismos moleculares da resistência a inseticidas químicos na população de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) da cidade do Funchal, Ilha da Madeira

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: MARQUES, Camila da Silva
Data de Publicação: 2020
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/97482
Resumo: Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) é uma espécie de mosquito com elevada importância médica devido ao facto de ser transmissora de agentes patogénicos de doenças como a dengue, febre amarela, chikungunya e Zika. Uma das principais medidas de controlo destas doenças é o controlo do vetor através da eliminação de criadouros. Outrora, o controlo feito principalmente com compostos químicos, conduziu ao aparecimento de culicídeos resistentes às principais classes de inseticidas passiveis de ser utilizadas em Saúde Pública. Diversos mecanismos de resistência podem ser responsáveis por este fenómeno como a resistência metabólica, resistência local-alvo, resistência comportamental e resistência por penetração reduzida do inseticida, para citar os mais conhecidos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o status de suscetibilidade de Aedes aegypti do Funchal a vários inseticidas e, adicionalmente, investigar os possíveis mecanismos moleculares que possam estar associados ao fenótipo da resistência. Foram feitos bioensaios de sensibilidade com larvas e adultos seguindo os protocolos descritos pela OMS. Adicionalmente, a presença de alelos de resistência do tipo kdr foi investigada, assim como a associação da variação no número de cópias (CNV) de genes de interesse com o fenótipo da resistência. Os resultados dos testes de suscetibilidade mostraram resistência a todos os inseticidas testados (temephos, deltametrina, permetrina, ciflutrina, bendiocarb e DDT), assim como para a dieldrina após testes laboratoriais complementares. As frequências alélicas para os diferentes alelos da mutação kdr foram as seguintes: 100% para a mutação F1534C; 31% para a mutação V1016I; e o alelo de resistência V410L foi encontrado pela primeira vez na Madeira, com uma frequência de 33%. Foi observado um aumento significativo (p<0,006) na frequência da mutação V1016I na Ilha da Madeira entre os anos de 2013 e 2019. A variação no número de cópias foi observada apenas em alguns genes e sem diferenças significativas para mosquitos suscetíveis e resistentes, o que é compatível com a existência de outros mecanismos de resistência, nomeadamente, as mutações kdr encontradas neste estudo.
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Diversos mecanismos de resistência podem ser responsáveis por este fenómeno como a resistência metabólica, resistência local-alvo, resistência comportamental e resistência por penetração reduzida do inseticida, para citar os mais conhecidos. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o status de suscetibilidade de Aedes aegypti do Funchal a vários inseticidas e, adicionalmente, investigar os possíveis mecanismos moleculares que possam estar associados ao fenótipo da resistência. Foram feitos bioensaios de sensibilidade com larvas e adultos seguindo os protocolos descritos pela OMS. Adicionalmente, a presença de alelos de resistência do tipo kdr foi investigada, assim como a associação da variação no número de cópias (CNV) de genes de interesse com o fenótipo da resistência. Os resultados dos testes de suscetibilidade mostraram resistência a todos os inseticidas testados (temephos, deltametrina, permetrina, ciflutrina, bendiocarb e DDT), assim como para a dieldrina após testes laboratoriais complementares. As frequências alélicas para os diferentes alelos da mutação kdr foram as seguintes: 100% para a mutação F1534C; 31% para a mutação V1016I; e o alelo de resistência V410L foi encontrado pela primeira vez na Madeira, com uma frequência de 33%. Foi observado um aumento significativo (p<0,006) na frequência da mutação V1016I na Ilha da Madeira entre os anos de 2013 e 2019. A variação no número de cópias foi observada apenas em alguns genes e sem diferenças significativas para mosquitos suscetíveis e resistentes, o que é compatível com a existência de outros mecanismos de resistência, nomeadamente, as mutações kdr encontradas neste estudo.Aedes aegypti (Linnaeus, 1762) is a species of mosquito with high medical importance since it transmits pathogens of diseases such as dengue, yellow fever, chikungunya and Zika. One of the main control measures for these diseases is vector control through the elimination of breeding sites. In the past, control was based, mainly, in the use of chemical compounds. This led to the emergence mosquitos’ populations resistant to the main classes of insecticides that can be used in Public Health. Several mechanisms may be involved in insecticide resistance, such as metabolic resistance, target-site resistance, behavioral resistance and reduced penetration resistance of the insecticide. The present study aimed to evaluate the susceptibility status of Aedes aegypti from Funchal to various insecticides, and to further investigate possible molecular mechanisms that may be associated with the resistance phenotype. Susceptibility bioassays were performed with larvae and adults, following the protocols described by WHO. Additionally, the presence of kdr resistance alleles was investigated, as well as the association of copy number variation (CNV) of genes of interest with the resistance phenotype. Results of the susceptibility bioassays showed resistance of Aedes aegypti of Funchal to all insecticides tested (temephos, deltamethrin, permethrin, cyfluthrin, bendiocarb and DDT), as well as to dieldrin, after complementary molecular tests. The allelic frequencies for the different alleles of the kdr mutations were as follows: 100% for the F1534C mutation; 31% for mutation V1016I; and the V410L resistance allele was first found in Madeira with a frequency of 33%. A significant increase (p <0.006) was observed in the frequency of the V1016I mutation in Madeira Island between 2013 and 2019. The variation in copy number was observed only in some genes and without significant differences for susceptible and resistant mosquitoes. which is compatible with the existence of another resistance mechanisms, namely, the kdr mutations found in this study. Key words: Aedes aegypti; InsecticideInstituto de Higiene e Medicina TropicalSOUSA, CarlaAYRES, Constância Flávia JunqueiraRUNMARQUES, Camila da Silva2020-05-11T14:40:47Z202020202020-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10362/97482TID:202481107porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-03-11T04:44:29Zoai:run.unl.pt:10362/97482Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T03:38:43.842826Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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