Síntese de novos fluoróforos para marcação de proteínas e ácidos nucleicos: aplicação ao Património Cultural

• Autor(a) principal: Eustáquio, Raquel Cachola
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/121393
• topic: marcadores fluorescentes; derivados de coumarinas; marcação de biomoléculas; Património Cultural; Domínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Engenharia Química

A preservação do Património Cultural é de extrema importância para toda a sociedade, ou seja, o desenvolvimento de novas estratégias e de metodologias de microanálise sensíveis é primordial para permitir planear estratégias eficazes de remediação e mitigação. A marcação com corantes fluorescentes é atualmente uma das metodologias mais usadas para fins bioanalíticos e, por isso, as técnicas de Hibridação In Situ Fluorescente (FISH), de marcação fluorescente direta de proteínas e os métodos de imunofluorescência direta ou indireta são consideradas ferramentas essenciais de análise no campo do Património Cultural. As coumarinas, quer sejam produtos naturais ou sintéticos, têm despertado um crescente interesse da comunidade científica nas últimas décadas devido à sua muito significativa atividade farmacológica e às suas excelentes propriedades fotofísicas. Neste trabalho, pretendeu-se desenvolver uma estratégia sintética simples e eficiente para produzir novos corantes fluorescentes derivados de coumarinas, foto-estáveis, solúveis em água e de baixo custo, para marcação de biomoléculas. Os fluoróforos sintetizados serão utilizados como marcadores de biomoléculas que permitirão a identificação de proteínas e de microrganismos em micro-amostras de bens do Património Cultural. Em relação aos objetivos inicialmente propostos, não se obteve qualquer derivado 3-substituido de 6,7-dimetoxi-2H-cromeno-2-tionas e de 7-(dietilamino)-4-metil-2H-cromeno-2-tionas, devido à deslocalização eletrónica induzida pelo enxofre na posição C-3. As tentativas de expansão da deslocalização eletrónica da posição 2 da 7-(dietilamino)-4-metil-2H-cromeno-2-tiona, não produziram percursores para marcadores fluorescentes. As reações de condensação aldólica realizadas a partir do grupo metilo do 2-(7-(dietilamino)-4-metil-2H-cromen-2-ilideno) malononitrilo, devido ao excecional caráter ácido destes protões neste composto, permitiram a síntese de novos derivados de cor vermelha, com máximos de absorção e emissão a comprimentos de onda mais longos, e obtidos através de uma estratégia sintética simples, eficiente e de baixo custo. Os excelentes resultados obtidos permitem concluir que o 2-(7-(dietilamino)-4-metil-2H-cromen-2-ilideno) malononitrilo, é um importante intermediário para a síntese de novos marcadores fluorescentes para biomoléculas.