Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereus

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Fonseca, Pedro Henrique Dobrões da
Data de Publicação: 2016
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10451/24652
Resumo: Tese de mestrado em Biologia Molecular e Genética, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2016
id RCAP_55e9e5c7b1a77c6fa95121752e100214
oai_identifier_str oai:repositorio.ul.pt:10451/24652
network_acronym_str RCAP
network_name_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository_id_str 7160
spelling Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereusBacillus cereusEnterotoxina não-hemolíticaHemolisina BLCereulidaqPCRHPLC-MSTeses de mestrado - 2016Domínio/Área Científica::Ciências Naturais::Ciências BiológicasTese de mestrado em Biologia Molecular e Genética, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2016As doenças transmitidas por alimentos (DTA) têm vindo a emergir como um problema importante no domínio da saúde pública, com importantes implicações de ordem económica. O Bacillus cereus é uma bactéria Gram-positiva, β-hemolítica, em forma de bastonete, anaeróbia facultativa formadora de endósporos, capazes de resistir a diversos fatores físicos e químicos, como variações de temperatura, desidratação, agentes oxidantes, entre outros. Esta bactéria é responsável por dois tipos de toxinfeção: Uma síndrome diarreica, causada pelas enterotoxinas não-hemolítica e hemolisina BL, produzidas durante o crescimento vegetativo no hospedeiro, que provocam diarreia aguda, náuseas e dores abdominais; uma síndrome emética, provocada pela toxina termorresistente cereulida, produzida pela bactéria nos alimentos, responsável por náuseas e vómitos. Estas toxinfeções apresentam baixa mortalidade e moderada morbilidade, existindo no entanto vários registos de mortes associadas a elas, em especial à síndrome emética. No presente trabalho foram estudadas 23 estirpes de B.cereus, provenientes de isolados obtidos a partir de amostras alimentares colhidas entre 2008 e 2010, no Exército Português. Foi realizada uma análise de expressão génica por PCR quantitativo com o objetivo de avaliar os padrões de expressão dos genes que codificam os componentes das três toxinas. Foram realizados testes de deteção indireta das três toxinas em estudo e foi realizada deteção e quantificação direta da toxina cereulida através de espectrometria de massa. Os resultados da prevalência dos genes que codificam os componentes das toxinas não-hemolítica e hemolisina BL através da pesquisa por PCR são coincidentes com vários estudos já publicados. No entanto, concluiu-se que a utilização dos resultados do qPCR para confirmar a produção destas toxinas por uma dada estirpe deve ser abordada com cautela. Foi desenvolvido e aplicado um teste de deteção de β-hemólise dupla para ser utilizado como teste indirecto de deteção da toxina hemolisina BL. Os resultados deste método foram promissores e apontam para um possível emprego na vertente de diagnóstico. Foi possível constatar que todas as estirpes estudadas possuem potencial toxinogénico para uma ou mais das toxinas em estudo. Estes resultados demonstram o impacto que este microorganismo pode ter no âmbito da Saúde Pública.Foodborne diseases have been emerging as a relevant problem in public health with important economic implications. Bacillus cereus is a Gram-positive, β-haemolytic, facultative anaerobe, rod-shaped bacterium. B.cereus is endospore-forming, and these spores are highly resistant to various forms of physical and chemical stress, such as temperature variations, dehydration and presence of oxidatives, among others. This bacterium is responsible for two types of food poisoning: A diarrheal syndrome, caused by non-haemolytic enterotoxin and haemolysin BL, produced during vegetative growth in the host’s gut, which cause acute diarrhea, nausea and abdominal cramps; an emetic syndrome, caused by the heat-resistant toxin cereulide, produced by the bacteria in foodstuffs, causing vomit and nausea. These syndromes have low mortality and moderate morbidity, but there have been fatal cases associated to them, especially the emetic syndrome. In this work, 23 B.cereus strains, collected from food samples obtained in the Portuguese Army between 2008 and 2010 were studied. A quantitative PCR gene expression analysis was performed to evaluate the expression patterns of the genes coding the three toxins’ components. Indirect detection tests for the three toxins studied were performed, as well as direct detection and quantification of the cereulide toxin through mass spectrometry. The prevalence results, obtained by PCR, of the genes coding the components of the non-haemolytic and haemolysin BL toxins are in accordance with studies already published. However, we concluded that using qPCR results to confirm the production of these toxins by a given strain must be done with caution. A double β-haemolysis detection test was developed and applied as an indirect test for detection of haemolysin BL toxin. The results obtained through this method were promising and point towards a possible usage in the diagnostics field.Santos, Mário de Almeida,1955-Gonçalves, Carlos Penha,1961-Repositório da Universidade de LisboaFonseca, Pedro Henrique Dobrões da2016-09-09T14:19:53Z201620162016-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10451/24652TID:201329034porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-11-08T16:13:42Zoai:repositorio.ul.pt:10451/24652Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T21:41:45.070092Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
dc.title.none.fl_str_mv Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereus
title Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereus
spellingShingle Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereus
Fonseca, Pedro Henrique Dobrões da
Bacillus cereus
Enterotoxina não-hemolítica
Hemolisina BL
Cereulida
qPCR
HPLC-MS
Teses de mestrado - 2016
Domínio/Área Científica::Ciências Naturais::Ciências Biológicas
title_short Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereus
title_full Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereus
title_fullStr Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereus
title_full_unstemmed Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereus
title_sort Análise da expressão e produção de enterotoxinas e toxina emética de Bacillus cereus
author Fonseca, Pedro Henrique Dobrões da
author_facet Fonseca, Pedro Henrique Dobrões da
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Santos, Mário de Almeida,1955-
Gonçalves, Carlos Penha,1961-
Repositório da Universidade de Lisboa
dc.contributor.author.fl_str_mv Fonseca, Pedro Henrique Dobrões da
dc.subject.por.fl_str_mv Bacillus cereus
Enterotoxina não-hemolítica
Hemolisina BL
Cereulida
qPCR
HPLC-MS
Teses de mestrado - 2016
Domínio/Área Científica::Ciências Naturais::Ciências Biológicas
topic Bacillus cereus
Enterotoxina não-hemolítica
Hemolisina BL
Cereulida
qPCR
HPLC-MS
Teses de mestrado - 2016
Domínio/Área Científica::Ciências Naturais::Ciências Biológicas
description Tese de mestrado em Biologia Molecular e Genética, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, 2016
publishDate 2016
dc.date.none.fl_str_mv 2016-09-09T14:19:53Z
2016
2016
2016-01-01T00:00:00Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10451/24652
TID:201329034
url http://hdl.handle.net/10451/24652
identifier_str_mv TID:201329034
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron:RCAAP
instname_str Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron_str RCAAP
institution RCAAP
reponame_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
collection Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository.name.fl_str_mv Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1799134329913212928

Registros relacionados