Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Serrenho, Inês Belchior
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10451/58013
Resumo: Tese de Mestrado, Biologia Humana e Ambiente, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências
id RCAP_56d3c7a25f105c637005a30318fc0d26
oai_identifier_str oai:repositorio.ul.pt:10451/58013
network_acronym_str RCAP
network_name_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository_id_str 7160
spelling Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12Aflatoxina B1Células Caco-2Células Caco-2/HT29-MTX-E12Integridade IntestinalCitotoxicidadeTese de mestrado - 2022Domínio/Área Científica::Ciências Naturais::Ciências BiológicasTese de Mestrado, Biologia Humana e Ambiente, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de CiênciasAs micotoxinas são toxinas naturais presentes maioritariamente nos alimentos sendo produzidas por várias espécies de fungos (Aspergillus, Fusarium e Penicillium). A aflatoxina B1 (AFB1) é o carcinógeno hepático mais potente conhecido em mamíferos, sendo classificada pela IARC no Grupo 1 (carcinogénico para humanos). A exposição a AFB1 pode afetar a população em geral, existindo um interesse crescente dos seus efeitos deletérios no trato gastrointestinal, dado as células epiteliais do intestino constituírem a primeira linha de defesa do organismo humano. Existem poucos dados disponíveis sobre o efeito de AFB1 no muco, uma importante barreira de proteção intestinal, sendo importante desenvolver estudos sobre os efeitos desta micotoxina em culturas de células intestinais produtoras de muco, o que não foi efetuado até ao momento. O objetivo deste trabalho consistiu no desenvolvimento de um estudo comparativo sobre os efeitos da AFB1 em culturas de células Caco-2 e co-culturas Caco-2/HT29-MTX-E12 (produtoras de muco). Utilizou-se várias metodologias in vitro incluindo um ensaio de citotoxicidade de AFB1; monitorização do crescimento/polarização da monocamada das células; ensaio de transporte da micotoxina através da membrana intestinal com verificação da integridade das células expostas através da resistência elétrica transepitelial (TEER) e microscopia de imunofluorescência confocal para avaliação da morfologia das células. Os resultados demonstraram que ambas as linhas celulares foram adequadas para a realização de estudos de exposição a micotoxinas. Verificou-se que a AFB1 afetou a integridade da membrana celular, existindo uma diminuição da TEER em função do tempo de exposição e alterações na morfologia das células expostas, em ambas as linhas celulares. Concluiu-se assim que o modelo de co-cultura mimetizou melhor as condições do intestino humano e evidenciou-se a ação da AFB1 na integridade das células da barreira intestinal. Nas co-culturas Caco-2/HT29-MTX-E12 os efeitos da AFB1, não foram tão evidentes, demonstrando-se assim o papel fundamental do muco enquanto barreira protetora.Mycotoxins are natural toxins present mostly in food and are produced by several species of fungi (Aspergillus, Fusarium and Penicillium). Aflatoxin B1 (AFB1) is the most potent liver carcinogen known in mammals and is classified by the IARC in Group 1 (carcinogenic to humans). Exposure to AFB1 can affect the general population, and there is a growing interest in its deleterious effects on the gastrointestinal tract, given that intestinal epithelial cells constitute the first line of defense of the human organism. There are few data available on the effect of AFB1 on mucus, an important intestinal protective barrier, thus it is important to develop studies on the effects of this mycotoxin on cultures of intestinal mucus-producing cells, which has not been done so far. The objective of this work was to develop a comparative study on the effects of AFB1 in Caco-2 cell cultures and Caco-2/HT29-MTXE12 co-cultures (mucus producing cells). Various in vitro methodologies were used including an AFB1 cytotoxicity assay; growth/polarization monitoring of cell monolayers; mycotoxin transport assay through the intestinal membrane with evaluation of the integrity of exposed cells through transepithelial electrical resistance (TEER) and confocal immunofluorescence microscopy to evaluate cells morphology. The results showed that both cell lines were suitable for performing mycotoxin exposure studies. It was found that AFB1 affected the integrity of the cell membrane, with a decrease in TEER as a function of exposure time and changes in the morphology of exposed cells, in both cell lines. It was concluded that the co-culture model better mimicked the conditions of the human intestine, and it was evidenced the action of AFB1 on the integrity of intestinal barrier cells. In the Caco-2/HT29-MTX-E12 co-cultures, the harmful effect of AFB1 on membrane integrity was not so evident, thus demonstrating the fundamental role of mucus as a protective barrier.Alvito, PaulaDias, Deodália Maria AntunesRepositório da Universidade de LisboaSerrenho, Inês Belchior2023-06-06T16:00:14Z202220222022-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10451/58013porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-11-08T17:06:47Zoai:repositorio.ul.pt:10451/58013Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T22:08:23.851218Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
dc.title.none.fl_str_mv Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12
title Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12
spellingShingle Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12
Serrenho, Inês Belchior
Aflatoxina B1
Células Caco-2
Células Caco-2/HT29-MTX-E12
Integridade Intestinal
Citotoxicidade
Tese de mestrado - 2022
Domínio/Área Científica::Ciências Naturais::Ciências Biológicas
title_short Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12
title_full Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12
title_fullStr Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12
title_full_unstemmed Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12
title_sort Efeitos da Aflatoxina B1 nos Modelos de Culturas e Co-culturas Celulares Caco-2 e Caco-2/HT29-MTX-E12
author Serrenho, Inês Belchior
author_facet Serrenho, Inês Belchior
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Alvito, Paula
Dias, Deodália Maria Antunes
Repositório da Universidade de Lisboa
dc.contributor.author.fl_str_mv Serrenho, Inês Belchior
dc.subject.por.fl_str_mv Aflatoxina B1
Células Caco-2
Células Caco-2/HT29-MTX-E12
Integridade Intestinal
Citotoxicidade
Tese de mestrado - 2022
Domínio/Área Científica::Ciências Naturais::Ciências Biológicas
topic Aflatoxina B1
Células Caco-2
Células Caco-2/HT29-MTX-E12
Integridade Intestinal
Citotoxicidade
Tese de mestrado - 2022
Domínio/Área Científica::Ciências Naturais::Ciências Biológicas
description Tese de Mestrado, Biologia Humana e Ambiente, 2022, Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências
publishDate 2022
dc.date.none.fl_str_mv 2022
2022
2022-01-01T00:00:00Z
2023-06-06T16:00:14Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10451/58013
url http://hdl.handle.net/10451/58013
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron:RCAAP
instname_str Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron_str RCAAP
institution RCAAP
reponame_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
collection Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository.name.fl_str_mv Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1799134638502838272

Registros relacionados