Aldehyde dehydrogenases as potential biomarkers in myeloid neoplasias

• Autor(a) principal: Macedo, Bárbara Beatriz Pinto
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/22674
• topic: Bioquímica; Aldeídos; Desidrogenases; Células estaminais hematopoiéticas; Tumores; Leucemia; Diagnóstico

A superfamília das desidrogenases dos aldeídos (ALDH) é constituída por 19 enzimas cuja principal função é a proteção do organismo contra aldeídos tóxicos. As ALDHs têm sido associadas ao desenvolvimento de múltiplas doenças. As síndromes mielodisplásicas (SMD) são caracterizadas por hematopoiese ineficaz associada a citopenias no sangue periférico e elevada predisposição para transformação leucémica. A leucemia mieloide aguda (LMA) é caracterizada por crescimento anómalo de células mieloides imaturas no sangue e na medula óssea. A fisiopatologia das SMDs e LMAs é um processo complexo de múltiplas etapas que envolve alterações genéticas e epigenéticas numa ampla variedade de genes associados à diferenciação, proliferação, auto-renovação e apoptose celulares. Uma vez que as ALDHs estão envolvidas em alguns destes processos biológicos, a desregulação destas enzimas pode influenciar o desenvolvimento de SMD e LMA. O objetivo deste estudo é avaliar a expressão génica das ALDHs em doentes com SMD e LMA de modo a verificar seu potencial como biomarcadores de diagnóstico e/ou prognóstico destas doenças. Neste contexto, analisou-se a expressão da ALDH1A1, ALDH1A2, ALDH1A3, ALDH1B1, ALDH1L1, ALDH1L2, ALDH2, ALDH3A1, ALDH3A2, ALDH3B1, ALDH3B2, ALDH4A1, ALDH5A1, ALDH7A1, ALDH16A1 e ALDH18A1 por PCR de transcriptase reversa. Os genes diferencialmente expressos (ALDH3A2, ALDH3B1, ALDH4A1 e ALDH18A1) foram quantificados, por PCR em tempo real, em 54 doentes, 34 com SMD e 20 com LMA, e em 34 controlos saudáveis. A análise estatística foi realizada com recurso aos testes de Kolmogorov-Smirnov, Mann-Whitney, Kruskal-Wallis e análise ROC. As diferenças foram consideradas significativas quando p<0.05. Os resultados mostraram que para as ALDH1A3, ALDH1L1, ALDH1L2, ALDH3A1, ALDH3B2 e ALDH5A1 não existem diferenças de expressão entre doentes com SMD, doentes com LMA e controlos. Os doentes com SMD e LMA apresentam níveis de expressão de ALDH3A2 (SMD: mediana 1.9251; distância interquartil 1.28; p=0.000618; LMA: mediana 1.5096; distância interquartil 0.99; p=0.008) e ALDH4A1 (SMD: mediana 0.1841; distância interquartil 0.47; p=0.01134; LMA: mediana 0.1635; distância interquartil 0.78; p=0.124) superiores aos observados nos controlos (ALDH3A2: mediana 0.4624; distância interquartil 1.53; ALDH4A1: mediana 0.0388; distância interquartil 0.12). Por outro lado, os doentes com SMD apresentam níveis de expressão mais elevados de ALDH3B1 (mediana 1.6445; distância interquartil 1.39) do que os doentes com LMA (mediana 0.4541; distância interquartil 0.47; p=0.000314) e controlos (mediana 0.3521; distância interquartil 0.51; p=5.9942E-07). Os diferentes subtipos de SMD apresentam expressão diferencial de ALDH3A2 e ALDH3B1. Além disso, os doentes com SMD e com LMA com alterações mielodisplásicas não expressam ALDH18A1. Seguidamente avaliou-se a expressão das ALDHs nos doentes de SMD estratificados de acordo com o WPSS (WHO classification-based Prognostic Scoring System) e verificou-se que os doentes de muito baixo risco apresentaram maior expressão de ALDH3B1 (mediana 17.6934; distância interquartil 16.32) comparativamente aos de risco intermédio (mediana 1.2352; distância interquartil 2.55; p=0.010) . Por fim, a expressão das isoformas de ALDH não parece influenciar a sobrevivência global de doentes com SMD e LMA ou a evolução de SMD para LMA. Em conclusão, este trabalho sugere que as isoformas de ALDH apresentam expressão diferencial em doentes com SMD e LMA relativamente a indivíduos saudáveis e entre si. A expressão de ALDH3B1 poderá ser um potencial biomarcador de diagnóstico de SMD. Além disso, uma vez que nenhum doente com SMD e LMA com alterações mielodisplásicas apresenta expressão da ALDH18A1, a expressão desta isoforma poderá ser um bom biomarcador de diagnóstico de mielodisplasia. Por fim, a expressão de ALDH3A2 demostrou ser um possível biomarcador de diagnóstico de LMA. No entanto, estudos adicionais com um maior número de amostras são necessários para provar o potencial dessas enzimas como biomarcadores de diagnóstico.