Estudos de interação de porfirinas e ftalocianinas catiónicas com ADN

• Autor(a) principal: Almeida, Susana Pinho de
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/25534
• topic: Porfirinas; Ftalocianinas; G-quadruplex; DNA; Métodos Espetroscópicos; Afinidade e Seletividade; Inibição da telomerase

A telomerase é a enzima responsável pela proliferação descontrolada de células tumorais. A estabilização, por ligandos, das estruturas de G-quadruplexes de ADN tem vindo a ser apontada como uma estratégia promissora na inibição da telomerase em terapias de cancro. Neste trabalho foram estudadas várias porfirinas e ftalocianinas catiónicas como potenciais ligandos estabilizadores de G-quadruplexes de ADN. Selecionou-se, como padrão, uma das porfirinas mais estudadas nesta área de investigação, a meso-tetraquis(Nmetilpiridínio- 4-il)porfirina (TMPyP), que apresenta como forte limitação a sua baixa seletividade para G-quadruplexes. Os estudos de afinidade e seletividade dos ligandos selecionados recorrendo a técnicas de espectroscopia de ultravioleta-visível mostraram que, quer a coordenação do núcleo da porfirina TMPyP com o ião metálico zinco(II) quer a presença de unidades de piridina cationizadas nas posições beta pirrólicas contribuem fortemente para o aumento da seletividade destes ligandos para G-quadruplexes. Relativamente à serie de ftalocianinas selecionadas foi possível concluir que a existência de um equilíbrio entre o número e posição das cargas positivas na estrutura destes ligandos é fundamental para a existência de seletividade para estruturas de G-quadruplexes. Os resultados dos estudos anteriores foram ainda corroborados recorrendo a técnicas espectroscópicas de fluorescência. Para os ligandos mais promissores foram também feitos estudos preliminares sobre as alterações conformacionais induzidas pela presença dos ligandos nas estruturas dos G-quadruplexes, usando o dicroísmo circular. Neste trabalho foi também desenvolvido um método de screening competitivo que permite avaliar a afinidade e seletividade para G-quadruplexes de novos ligandos de uma forma rápida e económica. O desenvolvimento deste método envolveu uma grande componente de otimização de condições experimentais, sendo a sua utilização possível em espetrofotómetros convencionais ou em espetrofotómetros com leitor de placas.