Study of Inflammation in Colorectal Cancer

• Autor(a) principal: Cardoso, Beatriz Alves
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/9234
• topic: MIF; colorretal; genotipagem; Imunohistoquímica; SNP

Globalmente, tanto em países economicamente desenvolvidos como em desenvolvimento, o cancro tornou-se um dos maiores problemas da sociedade hoje em dia. O Cancro colorretal é dos mais incidentes e frequentes na Europa. A proteína inibitória de macrófagos (MIF) é uma citocina envolvida na imunidade célular, imunorregulação e inflamação. É capaz de desencadear respostas imunes significativas autócrina e/ou parácrinamente através da indução de citocinas próinflamatórias. Como mediador pró-inflamatório, o MIF tem sido demonstrado como estando envolvido no cancro. O gene MIF possui um SNP putativamente funcional, transversão de G>C na região flanqueadora do gene (rs755622), que tem sido reportado como associado ao cancro colorretal (CCR) e outras doenças. Primeiramente, extraímos DNA de 172 amostras de sangue usando buffy coat. Posteriormente, procedeu-se à genotipagem das amostras extraídas utilizando-se a técnica de PCR em tempo real, com recurso a sondas Taqman, otimizadas para este SNP. Seguiu-se depois para sequenciação utilizando a técnica de Sanger para validação dos resultados. Obtivemos as seguintes frequências: GG 70%; GC 28%; CC 2%; consistente com frequências alélicas de 84% G e 16% C (similares às frequências alélicas presente na base de dados Ensembl: 81% -G; 19% -C). Após análise estatística entre o polimorfismo do MIF e os dados clínico-patológicos, não foi encontrada correlação significativa. Relativamente à técnica de imunohistoquímica também foi realizada em 32 amostras, não apenas para caracterizar a proteína MIF que foi o ponto focal, mas também na tentativa de estabelecer uma comparação entre MIF, macrófagos e a infiltração linfocitária em tumores utilizamos um anticorpo para a proteína MIF, outro para CD68 (receptor de macrófagos) e outro para CD3 (co-receptor de células T). Análises de genótipo-fenótipo foram realizadas entre TAMs, TILs e os genótipos MIF -173 G> C onde nenhuma significância foi encontrada. Em relação à intensidade e percentagem de células coradas com MIF, foram então correlacionados com os genótipos MIF -173 G> C,onde se encontrou significância na variável modelo aditivo quando referente à intensidade de coloração. O principal objetivo foi correlacionar todos os dados clinicopatológicos, genéticos e imunohistoquímicos, a fim de obter dados / conclusões que possam vir a ser úteis para a prática clínica e melhorar o tratamento e a sobrevida do paciente no futuro