Gastric proton pump expression in teleost fishes: nongastric sites of expression in gastric versus agastric fishes

• Autor(a) principal: Gonçalves, Odete Marinho
• Data de Publicação: 2008
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/217
• topic: Peixes; Fisiologia da nutrição; Técnicas analíticas; Enzimas

A bomba de protões gástrica ou H/K-ATPase é responsável pela acidificação do estômago nos vertebrados mas pode também ser encontrada em órgãos não gástricos onde é possível que tenha função de ionoregulação. A H/K-ATPase é um heterodímero composto por duas subunidades, e, codificadas pelos genes ATP4A e ATP4B, respectivamente. O gene ATP4A foi identificado no estômago de alguns teleósteos e nas brânquias de um elasmobrânquio mas não existem dados relativos à sua expressão em órgão extra gástricos em peixes teleósteos. Além disto, existem alguns teleósteos (ciprinídeos, peixes-balão) que são agástricos o que levanta a questão sobre se a expressão extra gástrica é dependente da expressão gástrica. Usando o RT-PCR para o ATP4A e através de anticorpos não homólogos para ATP4A e ATP4B, tentei determinar se a H/K-ATPase também é expressa nas brânquias de peixes teleósteos e se esta expressão é dependente da presença de um estômago funcional. Foram examinadas as seguintes espécies: GÁSTRICAS:Oncorhynchus mykiss e Gasterosteus aculeatus. AGÁSTRICAS:Tetraodon nigroviridis, Cyprinus carpio , Misgurnus anguillicaudatus e Daniorerio. Nas espécies gástricas, a H/K-ATPase foi detectada no estômago e na brânquia. Nas espécies agástricas, as análises insilico em bases de dados de genomas e o RT-PC R da brânquia e intestino falharam na identificação de ATP4A e os resultados de “immunoblotting” relativos à subunidade foram maioritariamente negativos. No entanto, as análises de “immunoblotting” da subunidade indicaram a presença de bandas immunoreactivas na brânquia (80-150kDa) e no intestino (110kDa) de algumas espécies. Nos peixes gástricos a subunidade é de aproximadamente 100kDa. A partir destes resultados, pode concluir-se que os teleósteos gástricos exprimem a H/K-ATPase na brânquia e os resultados imunológicos relativos a subunidade da H/K-ATPase nos peixes sem estômago sugerem mais estudos.