Caracterização das correntes de potássio de células embrionárias de rim humano (HEK293)

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Gonçalves, Patrícia Domingos, 1984-
Data de Publicação: 2009
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10451/8444
Resumo: Tese de mestrado. Biologia (Biologia Molecular Humana). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2009
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spelling Caracterização das correntes de potássio de células embrionárias de rim humano (HEK293)Biologia celularCorrentes de potássioCélulas embrionáriasTeses de mestrado - 2009Tese de mestrado. Biologia (Biologia Molecular Humana). Universidade de Lisboa, Faculdade de Ciências, 2009A linha celular derivada de rim humano embrionário (HEK293) é frequentemente utilizada em investigação electrofisiológica e bioquímica, servindo também de modelo celular para estudos de função renal. Estudos de patch clamp efectuados por outros autores mostraram a presença de canais regulados por voltagem de K+, Ca2+ e Na+ nestas células, assim como canais passivos de Cl-. Não há consenso em qual dos iões é o maior contribuidor para a corrente celular e a manutenção do potencial de membrana. Neste estudo caracterizaram-se as correntes de potássio nestas células na configuração de whole cell da técnica de patch clamp. Verificou-se a existência de dois tipos de correntes de potássio com rectificação positiva, de tipo inactivante e de tipo persistente. Observou-se ainda que a densidade das correntes é afectada pela presença intracelular de sódio e cloreto. As alterações observadas dos parâmetros das funções de Boltzmann assentes às curvas de activação das correntes inactivantes mostram haver alterações da sensibilidade dos canais à voltagem e do potencial a que metade dos canais está activa. Os resultados sugerem mecanismos de regulação diferentes por parte do sódio e do cloreto, e entre concentrações diferentes de cloreto. A corrente persistente mostra também sensibilidade aos outros iões. É possível que a saída de potássio através de canais em situações in vivo possa ser regulada de forma semelhante pelo sódio e pelo potássio.Human Embryonic Kidney cells (HEK293) are widely used for electrophysiological and biochemical investigation and as cellular model for kidney function studies. Previous patchclamp studies by other groups have demonstrated the expression of endogenous voltagegated K+, Ca2+ and Na+ channels and passive Cl- channels in this cell line. Nevertheless, there is no agreement on which ion is the major contributor to the cell current and to the maintenance of the resting potential. In this study, the whole cell configuration of the patch clamp technique was used to characterize the potassium currents from these cells under different intra and extracellular ionic conditions showed the existence of two types of positively rectifying potassium currents (inactivating and persistent). It was also observed a negative regulation of the cellular density of these currents by intracellular sodium and chloride. The observed changes of the parameters of a Boltzmann function fitted to the activation curves for the inactivating currents shows deviations of the potential at which half 5 of the channels are activated and/or the sensitivity to the voltage. The results suggest the existence of different mechanisms for the regulation by the different ions, and in particular for different concentrations of chloride. The persistent currents also show sensitivity to the intracellular presence of sodium and chloride. In vivo, the effects observed here may play a role in the regulation of exit of potassium through channels in situations in which the intracellular concentration of sodium and/or chloride changes during transepithelial salt transport.Fonseca, Paulo Jorge Quintais Cancela da, 1958-Bicho, AnaRepositório da Universidade de LisboaGonçalves, Patrícia Domingos, 1984-2013-05-13T14:09:42Z20092009-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10451/8444porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2023-11-08T15:52:19Zoai:repositorio.ul.pt:10451/8444Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T21:32:59.407308Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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