Detection and characterization of Salmonella in samples from pig carcasses

• Autor(a) principal: Lopes, Gabriela Sousa
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/10539
• topic: Salmonella; S. Typhimurium

Salmonella spp. é uma bactéria pertencente á família Enterobacteriaceae e existem mais de 2600 serovares identificados. Tem se tornado uma das principais causas de doenças transmitidas por alimentos, em humanos e animais, que pode levar ao aparecimento de hospitalizações e mesmo morte. Assim sendo, o controlo e a prevenção deste agente patogénico são de alta prioridade de forma a aumentar a segurança alimentar. A carne de porco é um dos maiores meios de transmissão desta bactéria e, normalmente, a contaminação ocorre durante o abate do animal tendo, portanto, as nossas amostras sido recolhidas de um matadouro. A caracterização das amostras foi executada em quatro passos. Primeiro, uma identificação do género Salmonella spp. seguido da distinção entre os dois serovares mais comuns (S. Typhimurium e S. Enteritidis) recorrendo ao PCR com primers para genes específicos. Depois, de forma a avaliar a variabilidade genética usamos primers ISSR que permitiram a analise das relações filogenéticas das nossas amostras. E por fim, selecionamos seis genes de virulência diferentes para amplificação de modo a aferir o potencial virulento presente nos isolados. Todas as 45 amostras confirmaram a presença de Salmonella, 38 foram identificadas como S. Typhimurium, uma como S. Enteritidis e seis não conseguimos uma identificação do serovar. A amplificação dos marcadores moleculares ISSR permitiu uma análise de polimorfismo e a avaliação da diversidade genética dentro do género Salmonella e das amostras recolhidas. Os resultados foram organizados num dendrograma representativo das suas relações filogenéticas com dois grupos diferentes. Obtivemos um total de 278 bandas, das quais 269 são polimórficas, indicando uma taxa de polimorfismo de 94.51%. Isto demonstra a elevada variabilidade entre as amostras salientando as diferenças no fenótipo e genótipo dentro do mesmo serovar. A análise da presença ou ausência dos genes de virulência selecionados, revelou a amplificação de todos pelo menos uma vez tendo sido o gene stn o mais amplificado com uma incidência de 90% enquanto que o gene spvB apenas amplificou em 29% das amostras. Foram identificados seis perfis de virulência diferentes baseados em seis loci, e no geral a maioria das amostras amplificou cinco genes. Este estudo forneceu informações acerca da disseminação de Salmonella na produção de carne de porco e também evidenciou a variabilidade genética e a potencial de virulência existente nos serovares aqui analisados.