Relevância do painel de diagnóstico fenotípico de Doenças Linfoproliferativas Crónicas de células B na identificação de rasgos fenotípicos displásicos nas linhas a neutrófilo, monocítica e eritroide

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Ferreira, Daniela Filipa Cardoso
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10316/83090
Resumo: Dissertação de Mestrado em Bioquímica apresentada à Faculdade de Ciências e Tecnologia
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spelling Relevância do painel de diagnóstico fenotípico de Doenças Linfoproliferativas Crónicas de células B na identificação de rasgos fenotípicos displásicos nas linhas a neutrófilo, monocítica e eritroideRelevance of the phenotypic diagnosis panel of B-cell Chronic Lymphoproliferative Disorders in the identification of dysplastic phenotypic features in neutrophil, monocytic and erythroid lineagesNeoplasias HematológicasSíndromes MielodisplásicasDoenças Linfoproliferativas Crónicas de células BImunofenótipoRasgos fenotípicos displásicosHematologic NeoplasmsMyelodysplastic SyndromesB-cell Chronic Lymphoproliferative DisordersImmunophenotypeDysplastic phenotypic featuresDissertação de Mestrado em Bioquímica apresentada à Faculdade de Ciências e TecnologiaNas últimas décadas, tem sido cada vez mais reportado na literatura a presença de doenças múltiplas num mesmo indivíduo, nomeadamente a coexistência de mais do que uma Doença Linfoproliferativa Crónica de células B (DLPC-B), a presença simultânea de uma Gamapatia Monoclonal e/ou Mieloma Múltiplo com Síndrome Mielodisplásica (SMD) e, mais recentemente casos diagnosticados com DLPC-B concomitante a SMD. Contudo, relativamente às últimas duas doenças, não se sabe ao certo qual o impacto da presença simultânea destas duas entidades na sobrevida global do doente, nem de que modo poderá influenciar o valor prognóstico nestes casos.Neste trabalho, avaliou-se a capacidade de um painel de diagnóstico fenotípico construído de forma a identificar e caracterizar fenotipicamente as células B patológicas numa amostra, de forma a poder classificar a doença de acordo com a classificação da OMS, e conseguir concomitantemente identificar rasgos fenotípicos displásicos nas linhas a neutrófilo (avaliação da expressão de CD10, CD43, CD31, CD305, CD11c e CD95), monocítica (CD43, CD31, CD305, CD11c, CD81, CD95, CD49d, CD39 e HLA-DR); e eritroide (CD43, CD95 e CD49d).Foram avaliadas 75 amostras de aspirados medulares de indivíduos, cuja idade variava entre 47 e 93 anos (74,5 ± 10,1 anos), sendo 48 do sexo masculino e 27 do sexo feminino; referentes a 51 amostras de doentes com diagnóstico de DLPC-B, 10 amostras de linfocitose B monoclonal (MBL), 8 amostras de doentes com diagnóstico de SMD e 6 amostras de MO normais. O grupo DLPC-B foi dividido em doentes diagnosticados com Linfomas não Hodgkin-B e em casos diagnosticados com Leucemia Linfocítica Crónica de células B/ Linfoma Linfocítico. Posteriormente, estes foram divididos em casos com displasia morfológica > a 10% das células pertencentes a uma das linhas hematopoiéticas; casos com displasia morfológica < a 10%; casos sem qualquer evidência de displasia morfológica. Em todas estas amostras procedeu-se à caracterização fenotípica das células B, por citometria de fluxo, com base no painel de diagnóstico preconizado pelo consórcio EuroFlow. Numa primeira abordagem comparou-se a expressão dos receptores acima mencionados entre o grupo SMD e Controlo, tendo-se observado diferenças estatisticamente significativas para CD10, CD305 e CD95 na linha a neutrófilo; para CD39 e HLA-DR na linha monocítica e para CD43, CD49d e CD95 na linha eritroide. Fomos depois avaliar se a expressão destes receptores se encontrava alterada nos diferentes grupos de DLPC-B/MBL gerados, tendo-se observado diferenças estatisticamente significativas no grupo com mais de 10% de displasia, para CD10 na linha a neutrófilo, para CD39 e HLA-DR na linha monocítica e para CD43 na linha eritroide. Os resultados obtidos apontam para a utilidade do painel de diagnóstico de DLPC-B na identificação de rasgos fenotípicos displásicos nas linhas hematopoiéticas estudadas, permitindo suspeitar da presença de SMD concomitante com uma DLPC-B. Este estudo permitiu, também, identificar novos receptores expressos nas diferentes linhas estudadas, ainda não descritos na literatura como sendo de interesse para o diagnóstico de SMD.In the last decades, the presence of multiple diseases in the same individual, such as the coexistence of more than one B-cell Chronic Lymphoproliferative Disorder (B-CLPD), the simultaneous presence of Monoclonal Gamapathy and/or Multiple Myeloma with Myelodysplastic Syndrome (MDS), and more recently cases diagnosed with B-CLPD concomitant with MDS. However, for the latter two diseases, the impact of the simultaneous presence of these two entities on overall patient survival is not known, nether how the prognostic value can be influenced in these cases. In this work, the ability of a panel of phenotypic diagnosis constructed to identify and characterize phenotypically the pathological B cells in a sample, in order to be able to classify the disease according to WHO classification, concomitantly to identify phenotypic dysplastic features in the neutrophil (evaluation of the expression CD10, CD43, CD31, CD305, CD11c and CD95), monocytic (CD43, CD31, CD31, CD11c, CD81, CD95, CD49d, CD39 and HLA-DR) and erythroid lineage (CD43, CD95 and CD49d), Seventy-five samples of spinal aspirates were evaluated, ranging in age from 47 to 93 years (74.5 ± 10.1 years), of which 48 were male and 27 were female; 51 samples from patients diagnosed with B-CLPD, 10 samples from monoclonal B-cell lymphocytosis (MBL), 8 samples from patients diagnosed with MDS and 6 samples from normal bone marrow (BM). The B-CLPD group was divided into patients diagnosed with B-cell Non-Hodgkin's Lymphoma and in cases diagnosed with B-cell Chronic Lymphocytic Leukemia / Lymphocytic Lymphoma. Subsequently, these were divided into cases with morphological dysplasia >10% of the cells belonging to one of the hematopoietic lineages; Cases with morphological dysplasia <10%; Cases without any evidence of morphological dysplasia. In all these samples the phenotypic characterization of B cells was performed by flow cytometry, based on the diagnostic panel recommended by the EuroFlow consortium. In a first approach the expression of the above mentioned receptors was compared between the MDS and Control groups, with statistically significant differences being observed for CD10, CD305 and CD95 in the neutrophil lineage; For CD39 and HLA-DR in the monocytic lineage, and for CD43, CD49d and CD95 in the erythroid lineage. Then, we evaluated whether the expression of these receptors was altered in the different B-CLPD/ MBL groups, and statistically significant differences were observed in the group with more than 10% dysplasia, for CD10 in the neutrophil lineage, for CD39 and HLA -DR in the monocytic lineage and for CD43 in the erythroid lineage. The results obtained point to the usefulness of the B-CLPD diagnostic panel in the identification of dysplastic phenotypic features in the hematopoietic lineages studied, allowing to suspect the presence of concomitant MDS with a B-CLPD. This study also allowed to identify new receptors expressed in the different lineages studied, not yet described in the literature as being of interest for the diagnosis of MDS.2017-09-20info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesishttp://hdl.handle.net/10316/83090http://hdl.handle.net/10316/83090TID:202121909pormetadata only accessinfo:eu-repo/semantics/openAccessFerreira, Daniela Filipa Cardosoreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2021-10-07T09:10:42Zoai:estudogeral.uc.pt:10316/83090Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-19T21:04:54.366736Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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