Differentiation of subpopulations of T lymphocytes by species of Leishmania causative of american cutaneous leishmaniasis

• Autor(a) principal: GONÇALVES, Patrícia Relvas Mourata
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/53902
• topic: Ciências biomédicas; Biologia molecular; Leishmaniose tegumentar americana; Células T; Imunidade adquirida; Células T reguladoras; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

Leishmaniose tegumentar americana (LTA) é uma doença negligenciada causada por parasitas intracelulares do género Leishmania. LTA afeta o centro e o sul do continente americano e pode apresentar variadas manifestações clínicas, mas geralmente é definida por ocorrência de lesões cutâneas que podem causar desfiguração. Apesar de afetar uma parte considerável da população pouco se sabe sobre a resposta imunitária às diversas espécies de Leishmania que causam esta doença. Assim, o principal objetivo deste trabalho foi estudar in vitro a diferenciação de subpopulações de linfócitos T induzida por parasitas causadores de LTA. Para realizar este estudo foram isoladas células mononucleares de baços de murganhos BALB/c saudáveis. As células foram incubadas com parasitas e antigénios parasitários durante 72h e magneticamente separadas nas frações celulares CD8- (correspondente a células CD4+) e CD8+. As células foram marcadas com anticorpos monoclonais anti-CD3, anti-CD25 e anti-FoxP3 e analisadas por citometria de fluxo. A frequência de células CD3+ e de linfócitos T CD4+ ou CD8+CD25FoxP3+, CD4+ ou CD8+CD25+FoxP3+ (células T reguladoras ou Treg), CD4+ ou CD8+CD25+FoxP3- e CD4+ ou CD8+CD25-FoxP3- (células T efectoras) e a intensidade da fluorescência dos flurocrómos associados às moléculas da membrana celular CD3 e CD25 e intracelular FoxP3 foram avaliadas. Foi observado aumento da subpopulação de células T CD4+CD25-FoxP3+ quando expostos a antigénios parasitários. Parasitas de L. amazonensis e L. shawi e os antigénios induziram a diferenciação da subpopulação de células Treg CD4+ e aumentaram a densidade das moléculas FoxP3 e CD25 mas reduziram os linfócitos T CD4+ efectores. Parasitas de L. guyanensis causaram a contração das subpopulações de linfócitos T CD4+CD25-FoxP3+ e Treg CD4+ e a redução da densidade das moléculas FoxP3, mas induziram o aumento das moléculas CD25 nas células Treg CD4+. Todos os parasitas e antigénios (excepto o antigénio de L. shawi) estimularam o aumento da população de células T CD4+CD25+FoxP3- e a densidade das moléculas CD25. Antigénio de L. shawi e parasitas de L. guyanensis causaram a diminuição de linfócitos T CD8+CD25-FoxP3+. Antigénio de L. guyanensis induziu a diferenciação da população de linfócitos Treg CD8+ e os parasitas de L. guyanensis e antigénio de L. shawi aumentaram a densidade das moléculas FoxP3. Todos os parasitas e antigénios (excepto o antigénio de L. guyanensis) causaram o aumento das células T CD8+CD25+FoxP3- e estimularam a densidade das moléculas CD25. Todos os parasitas e antigénios reduziram os linfócitos T CD8+ efectores. Conclui-se que tanto os antigénios como os parasitas regulam a diferenciação das subpopulações de linfócitos T, induzindo a expansão de células T associadas à regulação da reposta imunitária (CD4+/CD8+FoxP3+, CD4+/CD8+CD25+FoxP3+, CD4+/CD8+CD25+FoxP3-) promovendo a homeostasia imunitária e a tolerância parasitária e promovendo a redução da população de células T efectoras (CD4+/CD8+CD25-FoxP3-) procurando estabelecer infeções silenciosas. Adicionalmente, também conseguem regular a expressão das moléculas FoxP3 e CD25. Os parasitas de L. guyanensis destacam-se pelo forte podermodelador da expressão de moléculas CD25 e na expansão de células CD25+. A regulação de CD25 por parasitas de L. guyanensis pode ser crucial para desvendar o mecanismo que conduz à diferenciação celular do hospedeiro.