Estudo do potencial de virulência de Staphylococcus pseudintermedius associado a infeções de pele em animais de companhia

• Autor(a) principal: ANDRADE, Mariana Fernandes Sequeira de
• Data de Publicação: 2021
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/139938
• topic: Staphylococcus pseudintermedius; Ciências biomédicas; Biologia molecular; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas

A espécie Staphylococcus pseudintermedius é um agente patogénico oportunista, responsável pela maioria das infeções de pele e tecidos moles (SSTIs) em animais de companhia, nomeadamente em cães. A emergência e disseminação de estirpes resistentes à meticilina (MRSP) e multirresistentes (MDR) é uma crescente ameaça à saúde pública. A virulência em S. pseudintermedius é afetada por múltiplos fatores, incluindo a presença da leucocidina LukI e a produção de biofilme, ambos sob regulação do sistema acessório regulador agr. Os objetivos desta Dissertação foram: (i) caracterizar molecularmente o sistema agr; (ii) pesquisar a presença do determinante da leucocidina LukI; (iii) avaliar a capacidade de formação de biofilme e; (iv) avaliar o potencial de virulência de estirpes de interesse no modelo de infeção de Galleria mellonella. Para tal, foi estudada uma coleção de 155 S. pseudintermedius associados a SSTIs em cães, gatos e um coelho. A caracterização molecular do sistema agr foi feita através de PCR e sequenciação. A capacidade de formação de biofilme foi avaliada pelo método de adesão em placa com coloração por violeta de cristal. Foram pesquisados por PCR genes de interesse, nomeadamente o gene lukF que codifica para LukI e os genes icaADB associados à produção de biofilme. Estas características foram relacionadas com características previamente estabelecidas por meio de análise estatística, utilizando o teste do Qui-Quadrado. Finalmente, foram selecionadas duas estirpes produtoras de biofilme e pertencentes a linhagens clonais de interesse, para avaliar o seu potencial de virulência no modelo de infeção animal de G. mellonella, comparando-as com a estirpe tipo S. pseudintermedius DSM21284T. Os resultados obtidos revelaram agrIII como o tipo de agr mais frequente nesta coleção (45,8%, 71/155), seguindo-se agrIV (27,1%, 42/155), agrII (17,4%, 27/155) e agrI (9,7%, 15/155). A produção de biofilme foi detetada num terço da coleção (33,6%, 52/155), sendo influenciada pela concentração de NaCl para 26,5% (41/155) das estirpes. Salienta-se ainda que a produção de biofilme mostrou ser uma característica frequente em estirpes da linhagem ST71-agrIII. Os genes lukF e icaADB foram detetados em toda a coleção. A análise estatística destes dados revelou uma relação estatisticamente significativa entre o tipo de agr e a formação de biofilme, estando agrIII e agrI associados à produção e não produção de biofilme, respetivamente. Os ensaios de infeção em G. mellonella e a análise das curvas de sobrevivência de Kaplan-Meier sugerem um maior potencial de virulência da estirpe produtora de biofilme pertencente à linhagem ST118- agrII. Este estudo demonstra que a produção de biofilme é uma característica frequente em linhagens clonais de S. pseudintermedius resistentes aos antibióticos e associadas a SSTIs. É ainda sugerido um maior potencial de virulência de estirpes da linhagem clonal ST118. Estes resultados reforçam a necessidade de uma abordagem Uma Só Saúde no estudo de infeções causadas por esta bactéria de modo a otimizar o seu controlo e terapêutica.