Resistência a antibióticos em Enterococcus spp. em alimentos para animais ornamentais

• Autor(a) principal: Soares, Rúben Manuel Sobral
• Data de Publicação: 2022
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/11742
• topic: Enterococcus spp.; animais ornamentais

A resistência antimicrobiana representa um sério risco para a saúde pública, que se tem vindo a agravar devido ao uso excessivo e inadequado de antibióticos, na medicina humana e animal. Enterococcus é um género bacteriano fortemente associado a casos de infeções nosocomiais, e tem vindo a demonstrar ser resistente a várias classes de antimicrobianos, tendo uma enorme capacidade de adquirir e transferir genes de resistência. Vários estudos já demonstraram a presença abundante de Enterococcus spp. resistentes a antibióticos, principalmente em animais de produção e alimentos de origem animal. Neste estudo o principal objetivo foi demonstrar a presença de Enterococcus spp. em alimentos para animais ornamentais, e avaliar a existência de resistência antimicrobiana e produção de fatores de virulência nos isolados obtidos. Entre Fevereiro e Dezembro de 2020 foram recolhidas 57 amostras de ração para animais ornamentais (aves, peixes, mamíferos e répteis). A partir destas amostras, foram obtidos 103 isolados compatíveis de Enterococcus spp., utilizando os seguintes meios seletivos: Slanetz-Bartley e Kanamycin azida esculina agar. Estes isolados foram provenientes de 15 amostras de rações para aves, 9 de peixes e 4 de amostras de rações para répteis. A identificação dos isolados foi confirmada por testes bioquímicos de rotina. A suscetibilidade aos antimicrobianos foi realizada com recurso a 14 agentes antimicrobianos pelo método de difusão em disco de Kirby-Bauer, de acordo com os padrões do Clinical and Laboratory Standards Institute. Para complementar os resultados fenotípicos, procedeu-se também à análise genotípica, utilizando as técnicas de Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e eletroforese em gel de agarose, para identificação das espécies de Enterococcus spp., e avaliar a presença de genes de resistência à eritromicina (ermA, ermB e ermC), tetraciclina (tetL, tetM, tetK e tetO), quinupristina / dalfopristina (vatD e vatE), vancomicina (vanA e vanB), gentamicina (aac(6´)-aph(2´´)-Ia), cloranfenicol (catA) e estreptomicina (ant(6)-Ia) e 10 genes de virulência (esp, ace, gelE, agg, fsr, cpd, cylA, cylB, cylL, cylM). Os isolados de Enterococcus spp. apresentaram maior prevalência de resistência à rifampicina (77,7%), seguida da resistência à eritromicina (48,5%) e ciprofloxacina (37,9%). Por outro lado, nenhum dos isolados apresentou resistência à gentamicina e estreptomicina. Quase metade dos isolados (47,6%) apresentou perfil de multirresistência; 23,3% apresentaram resistência a 3 classes antimicrobianas diferentes, 6,8% a 4 e 17,5% a 5 ou mais classes. Ao nível genotípico, constatou-se que, a partir de 60 isolados de Enterococcus spp. testados, foram identificadas as seguintes espécies: E. faecalis (n = 22, 36,7%), E. faecium (n = 19, 31,7%), E. gallinarum (n = 15, 25%) e E. durans (n = 4, 6,7%). A maioria dos isolados de E. faecalis (n=14, 63,6%), E. faecium (n=9, 47,4%) e E. gallinarum (n=10, 66,7%) foram isolados a partir de alimentos para aves, seguido de alimentos para peixes e répteis. Três (75%) isolados de E.durans foram provenientes de rações para peixes e 1 isolado de ração para aves, não sendo detetado em alimentos de répteis. No geral, os genes de resistência mais predominantes foram ermB (n =34, 56,7%), tetL (n = 31, 51,7%), tetM (n = 22, 36,7%) e vanA (n = 23, 38,3%). E. gallinarum, seguida de E. faecium foram as espécies com mais isolados multirresistentes, com 50% e 22%, respetivamente. Foram ainda encontrados genes codificadores de virulência, com maior predominância dos genes cylL e esp, identificados em 31 (51,7%) e 24 (40%) isolados, respetivamente. A espécie E. gallinarum foi aquela que apresentou mais genes de virulência, enquanto que na espécie E.faecium, a presença destes genes foi muito pouco prevalente. Estes resultados demonstraram a presença significativa de Enterococcus spp. multirresistentes em alimentos fornecidos a animais ornamentais, tornando-se um problema de saúde pública dada a proximidade e interação do ser humano com esses animais. Esta caracterização fenotípica e genotípica reforça assim, a relevância do controlo de bactérias resistentes a antibióticos, para a saúde pública.