miR-371a-3p as a tool for subtyping Testicular Germ Cell Tumors
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2018 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | eng |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10348/8367 |
Resumo: | Os tumores de células germinativas testiculares (TGCTs) constituem um grupo heterogéneo de neoplasmas, afetando na maioria homens em idade jovem. As taxas de cura são elevadas e o tratamento adequado depende de uma avaliação clínica e patológica que seja cuidadosa e precisa. De fato, a subtipagem histopatológica dos TGCTs é um ponto crítico para uma decisão terapêutica adequada. Considerando a limitação dos biomarcadores de soro atualmente disponíveis, foram propostos novos candidatos, principalmente o miR-371a-3p, que superou os marcadores de soro clássicos, contudo não existe informação detalhada relativamente ao perfil de expressão nos vários subtipos de TGCTs. Deste modo, avaliamos os níveis dos níveis de expressão do miR-371a-3p nos vários subtipos de TGCT usando uma coorte consecutiva de amostras de tecido testicular. Após o isolamento do RNA e síntese de cDNA, os níveis de expressão do miR-371a-3p foram avaliados em 154 amostras de tecido de TGCT e em 15 tecidos não-tumorais por PCR quantitativo em tempo real (RT-qPCR). A fim de gerar uma curva padrão para a quantificação relativa e verificar a eficiência do PCR, o cDNA do RNA total de referência humano (Agilent, EUA) foi utilizado e, para a normalização, o RNU48 foi utilizado como um gene de referência. O miR-371a-3p discriminou tecidos tumorais de tecidos controlo com alta sensibilidade e especificidade (AUC = 0,99). Além disso, os seminomas apresentaram níveis mais elevados de expressão do miR-371a-3p em comparação com amostras de TGCT não-seminomatoso, revelando também diferenças significativas entre eles. Contudo, os TGCTs pré-púberes apresentaram níveis mais baixos de expressão do miR-371a-3p do que TGCTs pós-púberes. Globalmente, os níveis de expressão do miR-371a-3p diminuíram em paralelo com a diferenciação celular progressiva. Concluímos que o miR-371a-3p é específico para TGCT e pode ser clinicamente útil para a deteção precoce e monitorização desta doença oncológica. |
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Os tumores de células germinativas testiculares (TGCTs) constituem um grupo heterogéneo de neoplasmas, afetando na maioria homens em idade jovem. As taxas de cura são elevadas e o tratamento adequado depende de uma avaliação clínica e patológica que seja cuidadosa e precisa. De fato, a subtipagem histopatológica dos TGCTs é um ponto crítico para uma decisão terapêutica adequada. Considerando a limitação dos biomarcadores de soro atualmente disponíveis, foram propostos novos candidatos, principalmente o miR-371a-3p, que superou os marcadores de soro clássicos, contudo não existe informação detalhada relativamente ao perfil de expressão nos vários subtipos de TGCTs. Deste modo, avaliamos os níveis dos níveis de expressão do miR-371a-3p nos vários subtipos de TGCT usando uma coorte consecutiva de amostras de tecido testicular. Após o isolamento do RNA e síntese de cDNA, os níveis de expressão do miR-371a-3p foram avaliados em 154 amostras de tecido de TGCT e em 15 tecidos não-tumorais por PCR quantitativo em tempo real (RT-qPCR). A fim de gerar uma curva padrão para a quantificação relativa e verificar a eficiência do PCR, o cDNA do RNA total de referência humano (Agilent, EUA) foi utilizado e, para a normalização, o RNU48 foi utilizado como um gene de referência. O miR-371a-3p discriminou tecidos tumorais de tecidos controlo com alta sensibilidade e especificidade (AUC = 0,99). Além disso, os seminomas apresentaram níveis mais elevados de expressão do miR-371a-3p em comparação com amostras de TGCT não-seminomatoso, revelando também diferenças significativas entre eles. Contudo, os TGCTs pré-púberes apresentaram níveis mais baixos de expressão do miR-371a-3p do que TGCTs pós-púberes. Globalmente, os níveis de expressão do miR-371a-3p diminuíram em paralelo com a diferenciação celular progressiva. Concluímos que o miR-371a-3p é específico para TGCT e pode ser clinicamente útil para a deteção precoce e monitorização desta doença oncológica. |
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