Implementation of biomolecular methods to explore the mode of action of Exo-Wound in vitro

• Autor(a) principal: Gomes, Cláudia Filipa de Oliveira
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/22834
• topic: Bioquímica; Pele - Feridas; Biomateriais; Imunocitoquímica

Este trabalho descreve e apoia cientificamente as atividades realizadas durante o estágio de mestrado na Exogenus Therapeutics. Esta empresa portuguesa possui um produto biológico em desenvolvimento, Exo-Wound, que mostrou acelerar o processo de cicatrização de feridas, estimulando a regeneração da pele. Porém, os mecanismos implícitos aos efeitos benéficos exercidos pela sua substância ativa permanecem parcialmente desconhecidos. Neste contexto, uma das hipóteses de seu modo de ação está relacionada com a modulação da produção de proteínas de matriz extracelular e produção de fatores de crescimento por células da pele, como fibroblastos e queratinócitos. Assim, a implementação e validação de métodos analíticos que permitam a avaliação da expressão e produção destas ou de outras biomoléculas é crucial para compreender o modo de ação deste produto. Esta dissertação de mestrado apresenta os passos realizados necessários à implementação e otimização de métodos biomoleculares, nomeadamente Western Blot, Reverse Transcription Real-time Polymerase Chain Reaction e Imunocitoquímica, no laboratório da Exogenus Therapeutics. Além disso, os resultados aqui apresentados mostram a validação preliminar destas metodologias para a avaliação da expressão e produção de proteínas da matriz extracelular e da expressão de fatores de crescimento por linhas celulares da pele, como fibroblastos e queratinócitos cultivados in vitro.