Virulência e controlo biológico de Macrophomina phaseolina

• Autor(a) principal: Teixeira, Hélio Lopes
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/22653
• topic: Biologia molecular e celular; Fungos patogénicos; Ácido gama-aminobutirico; Controlo biológico

Macrophomina phaseolina é um fungo fitopatogénico com a capacidade de infetar mais 500 espécies de plantas. A infeção, denominada de podridão carbonosa, é responsável por elevados danos em campos de cultivo. Recentemente, foi descrito como um fungo oportunista em pacientes imunodeprimidos. O ácido gama-aminobutírico (GABA) é um aminoácido não proteinogénico, ubíquo, que se encontra amplamente distribuído na natureza, em microrganismos, plantas e animais. Desempenha diversos papéis na manutenção do estado fisiológico da planta. A primeira parte deste estudo, consistiu em verificar se o GABA promove a virulência de M. phaseolina. Foram selecionadas duas temperaturas (25º e 37ºC) e diferentes concentrações de GABA (0, 5 e 10mM). Na análise do crescimento de M. phaseolina os resultados obtidos sugerem que o GABA promove um ligeiro aumento no crescimento radial (cm) e um aumento na biomassa (g) de M. phaseolina em ambas as temperaturas testadas. Os resultados obtidos na determinação da atividade enzimática extracelular permitem constatar que a 25ºC, na presença de GABA, M. phaseolina apresenta uma maior aitivade amilolítica (%). Verificou-se também que, quando M. phaseolina cresce na presença de 5mM de GABA, a 25 e 37ºC, a atividade lipolítica (%) é maior. Os resultados obtidos na quantificação da atividade lipolítica permitem constatar que, em ambas as temperaturas de crescimento, quanto maior a concentração de GABA maior é a atividade lipolítica produzida por M. phaseolina. Quando se procedeu à quantificação de proteínas extracelulares, apenas a 37ºC ocorreu um aumento significativo de proteínas extracelulares secretadas por M. phaseolina, na presença de 10mM de GABA. No entanto, os resultados obtidos por SDS-PAGE, sugerem que, em ambas as temperaturas de crescimento, quanto maior a concentração de GABA maior é o número de proteínas secretadas por M. phaseolina. A 37ºC, na presença de 10mM de GABA, o secretoma de M. phaseolina apresentou níveis de fitotoxicidade mais elevados. Os ensaios de citotoxicidade, permitiram constatar que a 37ºC, na presença de 5mM de GABA, M. phaseolina provocou uma diminuição mais acentuada na viabilidade celular. Os resultados obtidos permitem equacionar um possível papel do GABA na virulência de M. phaseolina. A segunda parte deste estudo consistiu em verificar o potencial antagonista de Trichoderma harzianum T1A e Trichoderma atroviride T17 contra M. phaseolina. Os resultados obtidos indicam que T. harzianum T1A apresenta propriedades especificas, como a produção de compostos voláteis orgânicos e metabolitos, mais eficazes contra M. phaseolina, comparativamente com os produzidos por T. atroviride T17. No entanto, ambos podem ser considerados potenciais agentes de controlo biológico contra M. phaseolina.