Investigação da incidência de amibas de vida livre e Legionella em águas de sistemas geradores de aerossóis
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2022 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10362/140308 |
Resumo: | As bactérias Legionella, são ubíquas no ambiente e nos sistemas de água, estas bactérias multiplicam-se intracelularmente em amibas e outros protozoários, relação que é fulcral na sua ecologia e patogénese e que proporciona a criação de reservatórios que funcionam como focos de infeção. Com o presente trabalho, pretende-se estimar a persistência de amibas e Legionella nas várias amostras de água provenientes de sistemas geradores de aerossóis por forma a estabelecer a existência de uma correlação entre eles. Numa segunda parte, estudou-se a atividade bactericida do BMX-11 contra L. pneumophila. A deteção de Legionella foi efetuada por PCR em tempo real e para a deteção de amibas implementou-se duas metodologias, a cultura em meio líquido e a de PCR, utilizando o gene 18S rDNA. Os resultados positivos das amibas foram confirmados por sequenciação. A suscetibilidade de L. pneumophila ao BMX-11 foi determinada por ensaios de difusão em gelose e microdiluição. Nas 200 amostras analisadas, 100 negativas e 100 positivas para Legionella, detetou-se a presença de amibas em 2% e 87%, respetivamente. Estes resultados mostraram a existência de uma associação estatisticamente significativa entre a presença de amibas de vida livre e a presença de Legionella. Nas amostras que foram positivas por cultura foram identificados 6 morfotipos diferentes de amibas, em 61% foi detetado o morfotipo monotático e espécie Vermamoeba vermiformis. Analisando os resultados obtidos na cultura verificou que 37% apresentaram uma identificação concordante com a da sequenciação. Os ensaios com o BMX-11 mostraram que este composto apresentava um efeito bactericida (MIC = 4000 μg/mL), que poderá ser promissor para a prevenção de L. pneumophila. |
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Investigação da incidência de amibas de vida livre e Legionella em águas de sistemas geradores de aerossóisLegionellaamibasBMX-11águaculturaPCRDomínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e TecnologiasAs bactérias Legionella, são ubíquas no ambiente e nos sistemas de água, estas bactérias multiplicam-se intracelularmente em amibas e outros protozoários, relação que é fulcral na sua ecologia e patogénese e que proporciona a criação de reservatórios que funcionam como focos de infeção. Com o presente trabalho, pretende-se estimar a persistência de amibas e Legionella nas várias amostras de água provenientes de sistemas geradores de aerossóis por forma a estabelecer a existência de uma correlação entre eles. Numa segunda parte, estudou-se a atividade bactericida do BMX-11 contra L. pneumophila. A deteção de Legionella foi efetuada por PCR em tempo real e para a deteção de amibas implementou-se duas metodologias, a cultura em meio líquido e a de PCR, utilizando o gene 18S rDNA. Os resultados positivos das amibas foram confirmados por sequenciação. A suscetibilidade de L. pneumophila ao BMX-11 foi determinada por ensaios de difusão em gelose e microdiluição. Nas 200 amostras analisadas, 100 negativas e 100 positivas para Legionella, detetou-se a presença de amibas em 2% e 87%, respetivamente. Estes resultados mostraram a existência de uma associação estatisticamente significativa entre a presença de amibas de vida livre e a presença de Legionella. Nas amostras que foram positivas por cultura foram identificados 6 morfotipos diferentes de amibas, em 61% foi detetado o morfotipo monotático e espécie Vermamoeba vermiformis. Analisando os resultados obtidos na cultura verificou que 37% apresentaram uma identificação concordante com a da sequenciação. Os ensaios com o BMX-11 mostraram que este composto apresentava um efeito bactericida (MIC = 4000 μg/mL), que poderá ser promissor para a prevenção de L. pneumophila.Legionella are ubiquitous in the environment and in water systems these bacteria multiply intracellularly in amoebae and other protozoa, this relationship is central to their ecology and pathogenesis and provides the creation of reservoirs that act as infection focus. With this work, we intend to estimate the persistence of amoebae and Legionella in water samples from aerosol generating systems in order to establish the existence of a correlation between them. In a second part, the bactericidal activity of BMX-11 against L. pneumophila was studied. The detection of Legionella was performed by real-time PCR and for the detection of amoebae, two methodologies were implemented, culture in liquid medium and PCR, using the 18S rDNA gene. Sequencing was carried out to confirm the characterization performed in the amoebae cultures. The susceptibility of L. pneumophila to BMX-11 was determined by agar diffusion and microdilution assays. Of the 200 samples analysed, 100 negative and 100 positive for Legionella, amoebae were detected in 2% and 87%, respectively. These results show, that there is a statistically significant association in the presence of amoebae and Legionella in the analysed samples. In the samples that were positive by culture, 6 different morphotypes of amoeba were identified. In 61% were detected the monotactic morphotype and species Vermamoeba vermiformis. Analysing the results obtained by culture, 37% presented an identification consistent with the sequencing results. Assays with BMX-11 showed that this compound has a bactericidal effect (MIC = 4000 μg/mL), which could be promising for the prevention of L. pneumophilaFaculdade de Ciências Médicas (NMS) Instituto Superior Técnico (IST) Laboratório de Análises do Instituto Superior Técnico (LAIST)Chasqueira, Maria De JesusSantos, RicardoRUNFerreira, João Pedro Moniz Basílio2022-05-102025-06-10T00:00:00Z2022-05-10T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10362/140308porinfo:eu-repo/semantics/embargoedAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-03-11T05:17:21Zoai:run.unl.pt:10362/140308Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T03:49:36.547393Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
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As bactérias Legionella, são ubíquas no ambiente e nos sistemas de água, estas bactérias multiplicam-se intracelularmente em amibas e outros protozoários, relação que é fulcral na sua ecologia e patogénese e que proporciona a criação de reservatórios que funcionam como focos de infeção. Com o presente trabalho, pretende-se estimar a persistência de amibas e Legionella nas várias amostras de água provenientes de sistemas geradores de aerossóis por forma a estabelecer a existência de uma correlação entre eles. Numa segunda parte, estudou-se a atividade bactericida do BMX-11 contra L. pneumophila. A deteção de Legionella foi efetuada por PCR em tempo real e para a deteção de amibas implementou-se duas metodologias, a cultura em meio líquido e a de PCR, utilizando o gene 18S rDNA. Os resultados positivos das amibas foram confirmados por sequenciação. A suscetibilidade de L. pneumophila ao BMX-11 foi determinada por ensaios de difusão em gelose e microdiluição. Nas 200 amostras analisadas, 100 negativas e 100 positivas para Legionella, detetou-se a presença de amibas em 2% e 87%, respetivamente. Estes resultados mostraram a existência de uma associação estatisticamente significativa entre a presença de amibas de vida livre e a presença de Legionella. Nas amostras que foram positivas por cultura foram identificados 6 morfotipos diferentes de amibas, em 61% foi detetado o morfotipo monotático e espécie Vermamoeba vermiformis. Analisando os resultados obtidos na cultura verificou que 37% apresentaram uma identificação concordante com a da sequenciação. Os ensaios com o BMX-11 mostraram que este composto apresentava um efeito bactericida (MIC = 4000 μg/mL), que poderá ser promissor para a prevenção de L. pneumophila. |
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