O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Presa, Daniela Figueiredo Simões
Data de Publicação: 2011
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/5405
Resumo: Dissertação apresentada na Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para obtenção do grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina
id RCAP_c6f2d089ecf48107590ef9b1b21cca37
oai_identifier_str oai:run.unl.pt:10362/5405
network_acronym_str RCAP
network_name_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository_id_str 7160
spelling O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450NADPH-oxidoreductase do citocromo P450 humano (CYPOR)Citocromo b5CYP1A2CYP2A6Variantes Y459HY181D da CYPORDissertação apresentada na Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para obtenção do grau de Mestre em Genética Molecular e BiomedicinaEstudos anteriores indicaram que o b5 tem diferentes efeitos no complexo enzimático do CYP, dependendo do tipo de substrato e da forma de CYP envolvida. Para uma melhor compreensão do b5 no complexo enzimático do CYP, este trabalho pretendeu estudar o mecanismo de actuação e efeito do b5 no referido complexo. Para este fim, utilizamos um sistema bacteriano biplasmídico que permite a co-expressão de um CYP com a CYPOR na presença ou ausência de b5. Seleccionámos dois CYPs, o CYP1A2 e o CYP2A6, uma vez ter sido demonstrado que a presença de b5 exerce um forte estímulo sobre a actividade catalítica do CYP2A6, e que o CYP1A2 aparenta uma relativa insensibilidade à presença desta proteína. Como se pensa que o b5 actua sobre a eficiência da transferência de electrões da CYPOR para o CYP, escolheram-se duas variantes da CYPOR relacionadas com a Síndrome de Antley-Bixler, nomeadamente Y459H e Y181D, as quais contêm mutações que causam a debilitação da ligação dos grupos prostéticos FAD e FMN respectivamente, grupos directamente envolvidos na capacidade de fornecer electrões ao CYP. Após a validação dos diferentes sistemas bacterianos construídos, estes foram aplicados em duas abordagens ao estudo do b5 no complexo enzimático do CYP, nomeadamente a influência do b5 na capacidade do CYP1A2 e CYP2A6 para bioactivar mutagénios e, numa abordagem cinética, avaliando a actividade destes dois CYPs, utilizando substratos padrão. Os resultados indicaram que há uma competição da CYPOR e do b5 pelo sítio de ligação ao CYP, bem como da CYPOR e doo sistema redox bacteriano Fld/FdR. Foi também demonstrado que o b5 está envolvido no aumento da eficiência da transferência do segundo electrão para o CYP e consequente diminuição do desacoplamento, tornando a reacção mais eficiente. Verificou-se um maior efeito competitivo do b5 quando na presença da variante Y181D da CYPOR, que nos permite sugerir que a CYPOR-Y181D tem menor afinidade para o CYP, relativamente à CYPOR-Y459H e CYPOR consensual, indicando a importância do resíduo Y181 na interacção proteína-proteína no complexo CYPOR-CYP. Estas deduções são mais fortemente apoiadas pelos resultados provenientes dos estudos da bioactivação do que pelos estudos de cinética enzimática.Faculdade de Ciências e TecnologiaKranendonk, MichelRUNPresa, Daniela Figueiredo Simões2011-03-28T13:50:20Z20112011-01-01T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10362/5405porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-05-22T17:08:42Zoai:run.unl.pt:10362/5405Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openairemluisa.alvim@gmail.comopendoar:71602024-05-22T17:08:42Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
dc.title.none.fl_str_mv O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450
title O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450
spellingShingle O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450
Presa, Daniela Figueiredo Simões
NADPH-oxidoreductase do citocromo P450 humano (CYPOR)
Citocromo b5
CYP1A2
CYP2A6
Variantes Y459H
Y181D da CYPOR
title_short O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450
title_full O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450
title_fullStr O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450
title_full_unstemmed O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450
title_sort O citocromo b5 no complexo enzimático do citocromo P450
author Presa, Daniela Figueiredo Simões
author_facet Presa, Daniela Figueiredo Simões
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Kranendonk, Michel
RUN
dc.contributor.author.fl_str_mv Presa, Daniela Figueiredo Simões
dc.subject.por.fl_str_mv NADPH-oxidoreductase do citocromo P450 humano (CYPOR)
Citocromo b5
CYP1A2
CYP2A6
Variantes Y459H
Y181D da CYPOR
topic NADPH-oxidoreductase do citocromo P450 humano (CYPOR)
Citocromo b5
CYP1A2
CYP2A6
Variantes Y459H
Y181D da CYPOR
description Dissertação apresentada na Faculdade de Ciências e Tecnologia da Universidade Nova de Lisboa para obtenção do grau de Mestre em Genética Molecular e Biomedicina
publishDate 2011
dc.date.none.fl_str_mv 2011-03-28T13:50:20Z
2011
2011-01-01T00:00:00Z
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/10362/5405
url http://hdl.handle.net/10362/5405
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Faculdade de Ciências e Tecnologia
publisher.none.fl_str_mv Faculdade de Ciências e Tecnologia
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron:RCAAP
instname_str Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
instacron_str RCAAP
institution RCAAP
reponame_str Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
collection Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
repository.name.fl_str_mv Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação
repository.mail.fl_str_mv mluisa.alvim@gmail.com
_version_ 1817545456812556288

Registros relacionados