Estudos Citogenéticos em indivíduos em idade pediátrica com suspeita clínica de Síndrome de Williams: abordagem por MLPA

• Autor(a) principal: Figueiredo, Wilson Micael Duarte
• Data de Publicação: 2020
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/9918
• topic: Citogenética clínica; cariótipo

A obtenção de melhores preparações cromossómicas e a descoberta do número de cromossomas da espécie humana permitiu o desenvolvimento da citogenética clínica, especialmente após a descoberta de que certas doenças resultam de alterações na estrutura e/ou número dos cromossomas. O desenvolvimento das técnicas de bandeamento permitiu a identificação dos cromossomas assim como a sua análise. Apesar destes desenvolvimentos, ainda existiam limitações e foram criadas técnicas com resoluções superiores para as colmatar. Para tal, foram desenvolvidas técnicas citogenéticas moleculares que oferecem uma melhor resolução e a possibilidade de deteção de anomalias que antes não eram possíveis de detetar. Técnicas como a amplificação da sonda dependente da ligação multiplex (MLPA) que permite analisar até 50 sequências de DNA numa única reação e detetar variações no número de cópias (CNVs) de genes específicos, sendo por isso de interesse para detetar síndromes causadas por CNVs. A síndrome de Williams-Beuren (WBS) é uma dessas síndromes. É causada por uma microdeleção no braço longo do cromossoma 7 em 7q11.23. Os pacientes são afetados por um fenótipo muito característico que envolve dismorfia facial, atraso mental, malformação cardíaca congénita e um perfil psicológico específico. Ao longo deste estágio foi possível adquirir competências experimentais em técnicas de citogenética convencional e molecular através da observação e prática das mesmas. Foram tratadas mais de 400 amostras de sangue periférico e analisadas 25 amostras de sangue e duas de líquido amniótico com vista a obtenção do cariótipo. Alguns casos de interesse incluem, uma síndrome de Edwards, uma síndrome de Klinefelter, uma translocação Robertsoniana, uma inversão pericêntrica do cromossoma 1 e uma trissomia do cromossoma 16 em mosaico de baixa expressão que tinha sido detetada por aCGH. Foi implementada uma nova análise com a técnica de MLPA e o painel P029 B1-0315, assim como um novo software de análise (Coffalyser.Net) que mostrou excelentes resultados. Com esta análise foi possível caracterizar pacientes com WBS, oferecendo um teste genético rápido para confirmação da suspeita clínica assim como uma técnica mais simples para detetar a extensão de duplicações da região 7q11.23.