Role of mitochondrial p66Shc in nefazodone-induced mitochondrial toxicity on HepG2 cells

• Autor(a) principal: Silva, Ana Marta Ribeiro da
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/6943
• topic: Apoptose; Carcinoma hepatocelular (humano); Hepatotoxicidade; Linha celular; Nefazodona

A Nefazodona (NEF) é um fármaco antidepressivo, usado durante um longo período no tratamento da depressão. Apesar da sua eficácia, este fármaco foi retirado do mercado devido ao aparecimento de diversos casos de lesão hepática em pacientes submetidos a tratamento com NEF. A via de sinalização celular que envolve a proteína p66Shc, e a sua fosforilação na serina 36 (Ser36) após estimulo de stress, foi anteriormente associada à produção de espécies reactivas de oxigénio e à ocorrência de morte celular. De acordo com esta hipótese, a proteína p66Shc é translocada para a mitocôndria após uma situação de stress celular onde participa na produção de ROS, levando ao comprometimento da função mitocondrial e podendo, ainda, desencadear o processo de morte celular. O principal objectivo deste trabalho foi investigar a possibilidade de que esta via de sinalização seja activada na linha celular do carcinoma hepatocelular humano (HepG2) durante o tratamento com NEF. Os resultados obtidos revelaram um aumento do teor de p66Shc em células expostas à nefazodona por um perídodo de 72 h e ainda um surpeendente decréscimo da forma fosforilada desta proteína após o tratamento com NEF. Embora este trabalho não possa comprovar a existência de uma ligação entre a administração de NEF e a activação e translocação da proteína p66Shc, os resultados obtidos corroboram a existência de uma associação entre o tratamento com NEF e o início do processo apoptótico no modelo celular utilizado. O tratamento com NEF levou à diminuição da massa celular, à despolarização mitocondrial e ainda a alterações na morfologia celular, com as células HepG2 a exibirem caracteristicas tipicamente encontradas em células apoptóticas. Foram também encontradas outras evidências consistentes com a activação da apoptose induzida por NEF, como o aumento da população de células apoptóticas, a diminuição da população de células viáveis e o aumento da actividade das caspases. Em suma, os resultados obtidos mostram um aumento dos níveis de ROS após o tratamento com NEF, embora a possibilidade de uma associação entre este aumento e a activação da p66Shc e translocação para a mitocôndria possa estar ocultada devido ao rápido processamento da forma fosforilada da proteína p66Shc.