Imunovariabilidade da proteína ativadora de neutrófilos da Helicobacter pylori

• Autor(a) principal: Marçal, Inês Filipa
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.14/17424
• topic: Helicobacter pylori; Proteína de ativação de neutrófilos; Antigénio; Vacina; Testes de diagnóstico; Imunovariabilidade; Neutrophil activation protein; Antigen; Vaccine; Diagnostic tests; Imunovariability; Domínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Outras Engenharias e Tecnologias

A Helicobacter pylori é uma bactéria que coloniza o estômago humano e pode levar ao desenvolvimento de patologias gástricas como a gastrite crónica, úlceras pépticas, linfoma de MALT e o adenocarcinoma gástrico. Devido à sua diversidade genética e à robusta estratégia de infeção, tem sido dificil o desenvolvimento de uma vacina, para prevenir e erradicar a infeção, bem como o desenvolvimento de testes de diagnóstico eficazes. A proteína de ativação de neutrófilos (NAP) da H. pylori, constitui um dos principais fatores de virulência, que devido à sua capacidade de ativar neutrófilos, representa um importante papel no processo da infeção crónica. Neste trabalho, observou-se por diversos métodos de bioinformática que a NAP apresenta alguma diversidade genética mas uma sequência proteica conservada, tendo-se estimado as regiões teoricamente mais antigénicas e que devem ser consideradas no desenho de testes de diagnóstico e de vacinas baseado neste antigénio. De forma a avaliar o potencial desta proteína como antigénio na conceção de vacinas e de testes de diagnóstico avaliou-se experimentalmente a imunovariabilidade da NAP. Para isso, foram formuladas duas vacinas, uma proteica e outra de DNA, baseadas na inserção do gene da NAP da estirpe de referência H. pylori 26695, no plasmídeo procariota pQE30 e no plasmídeo eucariota pVAX. Observou-se em murganhos imunizados com estas vacinas uma resposta imune equilibrada Th1 e Th2. Observou-se de igual forma, em Western blots, o reconhecimento da NAP extraída de diversas estirpes de H. pylori obtidas de pacientes de diversos pontos do globo, pelos anticorpos policlonais obtidos da imunização com a NAP da estirpe H. pylori 26695. Desta forma, confirmou-se a elevada conservação imunogénica desta proteína, realçando a relevância de utilização deste alvo na conceção de vacinas e de testes de diagnóstico.