Efeito da exposição ao cobre na indução de autofagia em brânquia de peixe-zebra, Danio rerio
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2016 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10348/7839 |
Resumo: | Os metais pesados são substâncias tóxicas que causam grandes preocupações ambientais devido à sua ampla dispersão. Atualmente, o cobre tem um uso generalizado que leva à sua acumulação no meio ambiente, mais propriamente no meio aquático. Apesar de ser um elemento essencial, em concentrações elevadas torna-se tóxico provocando alterações nos animais expostos, podendo mesmo conduzir à morte. Muitas dessas alterações estão associadas a processos de morte celular, como por exemplo, a autofagia. A autofagia é um mecanismo catabólico que envolve a digestão, através dos lisossomas, de componentes celulares disfuncionais ou danificados, desempenhando um papel importantíssimo no controlo da homeostasia celular. O processo autofágico pode funcionar como uma estratégia de sobrevivência, podendo ser iniciado por várias perturbações no organismo como, a falta de determinados nutrientes ou o excesso deles. No presente trabalho pretendeu-se avaliar o papel do cobre na indução de autofagia em brânquia de peixe-zebra (Danio rerio). Os animais foram expostos a duas concentrações de cobre (12,5 μg L-1 e 100 μg L-1), durante 48 horas. Às 6, 12, 24 e 48 horas foram efetuadas colheitas de brânquias de animais controlo e expostos para análise ultraestrutural, por microscopia eletrónica de transmissão (TEM) e para o estudo da expressão do gene LC3, por RT-PCR. Os resultados obtidos demonstram que o cobre inibiu a expressão do gene LC3 nas concentrações em estudo e durante o período do ensaio. Adicionalmente, a análise ultrastrutural também não revela aumento na presença de autofagossomas. Em conclusão, o presente estudo demonstra, pela primeira vez, que o cobre inibe o processo autofágico mediado por LC3, apesar de estar bem estabelecido que, nas mesmas concentrações utilizadas neste estudo, o cobre é capaz de induzir morte celular por apoptose. No futuro, serão necessários estudos adicionais para esclarecer se o cobre poderá estar envolvido na regulação da autofagia através de outras vias de sinalização. |
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Efeito da exposição ao cobre na indução de autofagia em brânquia de peixe-zebra, Danio rerioPeixe-Zebra (Danio rerio)CobreAutofagiaUltraestruturaOs metais pesados são substâncias tóxicas que causam grandes preocupações ambientais devido à sua ampla dispersão. Atualmente, o cobre tem um uso generalizado que leva à sua acumulação no meio ambiente, mais propriamente no meio aquático. Apesar de ser um elemento essencial, em concentrações elevadas torna-se tóxico provocando alterações nos animais expostos, podendo mesmo conduzir à morte. Muitas dessas alterações estão associadas a processos de morte celular, como por exemplo, a autofagia. A autofagia é um mecanismo catabólico que envolve a digestão, através dos lisossomas, de componentes celulares disfuncionais ou danificados, desempenhando um papel importantíssimo no controlo da homeostasia celular. O processo autofágico pode funcionar como uma estratégia de sobrevivência, podendo ser iniciado por várias perturbações no organismo como, a falta de determinados nutrientes ou o excesso deles. No presente trabalho pretendeu-se avaliar o papel do cobre na indução de autofagia em brânquia de peixe-zebra (Danio rerio). Os animais foram expostos a duas concentrações de cobre (12,5 μg L-1 e 100 μg L-1), durante 48 horas. Às 6, 12, 24 e 48 horas foram efetuadas colheitas de brânquias de animais controlo e expostos para análise ultraestrutural, por microscopia eletrónica de transmissão (TEM) e para o estudo da expressão do gene LC3, por RT-PCR. Os resultados obtidos demonstram que o cobre inibiu a expressão do gene LC3 nas concentrações em estudo e durante o período do ensaio. Adicionalmente, a análise ultrastrutural também não revela aumento na presença de autofagossomas. Em conclusão, o presente estudo demonstra, pela primeira vez, que o cobre inibe o processo autofágico mediado por LC3, apesar de estar bem estabelecido que, nas mesmas concentrações utilizadas neste estudo, o cobre é capaz de induzir morte celular por apoptose. No futuro, serão necessários estudos adicionais para esclarecer se o cobre poderá estar envolvido na regulação da autofagia através de outras vias de sinalização.Heavy metals are toxic substances that can cause great environmental concerns due to their vast dispersion. Nowadays, copper has a universal use leading to its accumulation in the environment, specifically in the water. Despite being an essential element, when present in high concentrations, it becomes toxic, inducing alterations in the exposed animals, and potentially leading to animals death. Many of these alterations are associated with cell death processes, such as autophagy. This is a catabolic mechanism involving digestion, by lysosomes, of dysfunctional or damaged cellular compounds, which pays an important role in the control of cellular homeostasis. The autophagy process can work as a survival strategy, and it can be triggered by several disturbances in the organism as the lack of some nutrients or their excess. In this work we aimed to evaluate the role of copper in the induction of autophagy in zebrafish (Danio rerio) gill. The animals were exposed to two concentrations of copper (12.5 μg L-1 and 100 μg L-1) during 48 hours. The gills of the control and exposed animals were collected at 6, 12, 24 and 48 hours for ultrastructural analysis, by transmission electronic microscopy (TEM) and to study the expression of the LC3 gene, by RT-PCR. The results demonstrate that the copper concentrations used inhibited the expression of the LC3 gene during the test period. In addition, ultrastructural analysis also showed no increase in the number of autophagosomes. In conclusion, this study shows for the first time that copper inhibits the autophagy process by LC3, despite being well established that with the same concentrations used in this study, copper is able to induce cell death by apoptosis. In the future, additional studies will be necessary to clarify if copper can be involved in the regulation of autophagy through other signaling pathways.2017-07-07T10:12:56Z2016-01-01T00:00:00Z2016info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10348/7839pormetadata only accessinfo:eu-repo/semantics/openAccessCosta, Bruna Isabel Gonçalvesreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-02-02T12:40:45Zoai:repositorio.utad.pt:10348/7839Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T02:02:39.900743Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
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