Indução de embriogénese somática em Pinus elliottii e o hibrido

• Autor(a) principal: Almeida, Ana Raquel Costa
• Data de Publicação: 2013
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/11836
• topic: Biologia molecular; Pinheiro; Embriologia; Pinus elliotti

Dada a importância comercial de Pinus elliottii e do híbrido Pinus elliottii x Pinus caribaea, e a necessidade de desenvolver uma bateria de protocolos de cultura in vitro para aplicação em programas de (micro) propagação e em programas de investigação em geral (eg, fisiologia, biologia molecular, etc), estabeleceu-se como objetivo principal estudar o efeito de vários fatores (endógenos e exógenos) na indução de: a) tecido caloso (importante em estudos fundamentais de fisiologia, manutenção de germoplasma, morfogénese, etc); b) tecido caloso embriogénico (importante para a regeneração de plantas por ES, estudos de criopreservação, etc). Neste sentido, embriões zigóticos maduros (EZM) e cotilédones foram sujeitos a diferentes concentrações de reguladores de crescimento (2 mg/L de 2,4-D; 2 mg/L de NAA e 0,02 mg/L de TDZ). Os primeiros sinais de callus surgiram ao fim de 15 dias. A concentração de reguladores de crescimento mais eficiente em EZM foi 2 mg/L de 2,4-D com uma taxa de indução de calli de 85% e em cotilédones foi 2 mg/L de 2,4-D com 55% de indução de calli. EZM foram sujeitos a diferentes concentrações de reguladores de crescimento (2,4 mg/L 2,4-D + 1 mg/L 24-epiBr; 8 mg/L 2,4-D + 4 mg/L BAP); fontes de carbono (30 g/L de sacarose e 30 g/L de maltose) e diferentes fatores de stresse, nomeadamente calor (80ºC), frio (-15ºC), ácido salicílico (AS) (1 mg/L), prolina (250 mg/L), peróxido de hidrogénio (H2O2) (9 μL/L) e putrescina (2 mg/L) com o objetivo de testar o seu potencial na indução de callus. A combinação 2,4-D + 24-epiBr resultou em 10 % de explantes com calli, e a 2,4-D + BAP representou 30 %. Os meios com sacarose e maltose representaram, igualmente, 20% de explantes com calli. O frio induziu callus em 100% dos explantes contrariamente ao calor que apenas produziu 5 %. Em resposta ao AS, prolina, H2O2 e putrescina a indução de callus foi de 93%, 95%, 90% e 100%, respetivamente. As condições que levaram a maior produção de callus foram o frio e a putrescina. Estes resultados suportam a possível indução de callus nestas duas coníferas, e suportam dados preliminares no sentido da otimização de protocolos eficazes para a ES.