Influência da Diabetes Mellitus no potencial osteogénico das células do estroma derivadas do tecido adiposo

• Autor(a) principal: Silva, Daniela Moreira da
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/9489
• topic: células do estroma; diabetes mellitus

A diabetes mellitus, caracterizada por hiperglicemia, é a doença endocrinológica mais frequente no Mundo. A condição diabética está associada a alterações no tecido e metabolismo ósseo que se manifestam numa reduzida massa óssea, aumento do número de fraturas ósseas e atraso no processo de reparação/regeneração da fratura. Tendo em consideração a problemática da regeneração óssea em pacientes com Diabetes mellitus têm sido investigadas possíveis estratégias terapêuticas para promover o processo regenerativo, nomeadamente no âmbito da engenharia de tecidos, com recurso a populações celulares. Uma destas abordagens engloba a utilização de células do estroma derivadas do tecido adiposo (ADSC). Estas células possuem a capacidade de se autorrenovarem e o potencial de se diferenciarem em diferentes linhagens, incluindo a linhagem osteogénica. São obtidas em grande quantidade e através de métodos minimamente invasivos, sendo por isso, bastante atrativas para uso terapêutico desempenhando um potencial papel central na formação e regeneração óssea e em estratégias de engenharia tecidular. Embora existam estudos sobre procedimentos de colheita e isolamento de ADSCs, pouca atenção tem sido dada às diferenças biológicas relacionadas às diferentes localizações anatómicas e, particularmente em condições comprometidas como aquelas induzidas por diabetes. Assim, este trabalho experimental teve como objetivo estabelecer culturas de ADSCs, de forma a estudar os efeitos diretos da hiperglicemia sobre estas células, a partir de diferentes localizações anatómicas nomeadamente, do tecido adiposo castanho, subcutâneo, pericoronário, perirenal e mesentérico, usando o rato como modelo experimental. As culturas celulares, obtidas por dissociação enzimática, foram cultivadas em condição basal e em condição osteogénica – ambas com suplementação de 25mM de Dglicose, de forma a mimetizar a condição hiperglicémica – e posteriormente caraterizadas, em diferentes períodos de avaliação, quanto ao seu potencial de diferenciação por técnicas bioquímicas, histoquímicas e de expressão génica. Nos resultados deste trabalho, verificamos um comportamento biológico distinto de culturas de ADSCs isoladas de diferentes localizações anatómicas. Contudo, as culturas de células do tecido adiposo pericoronário apresentaram maior potencial osteogénico precoce enquanto o tecido adiposo subcutâneo apresentou maior potencial osteogénico tardio, demonstrado pelo aumento da expressão dos genes Runx2 e Osteocalcina, respetivamente, sugerindo então que as ADSCs obtidas a partir destes tecidos podem apresentar maior comprometimento osteoblástico e uma maior adequação à sua utilização em abordagens regenerativas. Assim, dadas as diferenças funcionais observadas nas ADSCs cultivadas a partir das diferentes localizações anatómicas, é fundamental para a terapêutica da diabetes mellitus escolher o local anatómico mais adequado para recolha do tecido adiposo, de forma a otimizar a possível abordagem terapêutica com a utilização destas células.