Identificação de determinantes de resistência em P. falciparum

• Autor(a) principal: Marques, João Pedro Nogueira
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/10904
• topic: Bioquímica; Microorganismos patogénicos; Resistência a antibióticos; Proteómica; Plasmodium falciparum

O presente estudo teve como objetivo a análise de possíveis determinantes de resistência por parte do Plasmodium falciparum ao fármaco antimalarico mefloquina. Para tal foi utilizada a estirpe W2, resistente à cloroquina e sensível à mefloquina, e uma estirpe isogénica W2mef, derivada de W2 e obtida por pressão seletiva em meio rico em mefloquina. Procedeu-se a um fracionamento subcelular e analisaram-se os extractos obtidos, com recurso a marcação com isótopos, O18 e iTRAQ, seguida de LC MS/MS MALDI, tendo sido identificadas 248 proteínas, sendo 76 de P. falciparum e 172 de Homo sapiens. Verificaram-se alterações na expressão proteómica de 10 proteínas de P. falciparum e 7 de Homo sapiens. A análise da atividade proteolítica por zimografia, revelou a diferenças relevantes de atividade proteásica nas amostras de W2mef, tendo sido identificada a aminopeptidase, “M1 family aminopeptidase”. Através dos resultados a atividade proteolítica em conjugação com análise bioinformática verificou-se que a protease identificada, tem um papel relevante na via de degradação da hemoglobina, estabelecendo interações indiretas com proteínas que se sabe estarem envolvidas no processo de obtenção de a.a., fundamental para a sobrevivência e desenvolvimento parasitário. Em suma as significativas diferenças de atividade proteolítica das amostras com a estirpe resistente e o facto da “M1 family aminopeptidase” estar associada a um processo vital para o desenvolvimento do parasita, faz com que esta protease possa ser apontada como o novo determinante para o desenvolvimento de novos fármacos, nomeadamente baseados em inibidores da PfA-M1.