Avaliação in vitro do efeito de antioxidantes e inibidores da apoptose/autofagia na nefrotoxicidade induzida por catinonas sintéticas

• Autor(a) principal: Vaz, Isa Maria Miranda
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10284/7355
• topic: Catinonas sintéticas; Nefrotoxicidade; Células HK-2; Morte celular; Antioxidantes; Autofagia; Apoptose; Synthetic cathinones; Nephrotoxicity; HK-2 cells; Cell death; Antioxidants; Autophagy; Apoptosis; Domínio/Área Científica::Ciências Médicas::Medicina Básica

A introdução incessante de novas substâncias psicoativas no mercado das drogas recreativas e consequente consumo humano continuam a ser um desafio considerável em termos de saúde pública e para as políticas no que toca às drogas. Dentre as várias classes de drogas emergentes, destacam-se as catinonas sintéticas. Foram já descritos vários efeitos adversos associados ao consumo de catinonas sintéticas, incluindo lesões renais, sendo que os mecanismos subjacentes a essa nefrotoxicidade não estão ainda esclarecidos. Neste trabalho pretendeu-se avaliar o potencial nefrotóxico in vitro de duas catinonas frequentemente consumidas, nomeadamente a metilona e a 3,4-dimetilmetcatinona (3,4-DMMC), em células epiteliais do túbulo proximal humano (HK-2). A viabilidade celular foi avaliada usando o ensaio de redução do MTT e o teste de incorporação do corante vermelho neutro. As alterações morfológicas foram identificadas por microscopia de contraste de fase e de fluorescência utilizando marcação com laranja de acridina. Além disso, com o objetivo de explorar os mecanismos subjacentes à toxicidade observada, foram ainda avaliados os efeitos de antioxidantes (ácido ascórbico e N-acetilcisteína), inibidores da apoptose (Z-VAD e Ac-LETD-CHO) e inibidores da autofagia (3-metiladenina e a wortmanina) na citotoxicidade induzida pelas drogas em estudo. Os resultados obtidos mostraram que ambos os derivados induziram citotoxicidade de modo dependente da concentração e do tempo de exposição, tendo o derivado 3,4-DMMC exibido um maior potencial nefrotóxico. Tanto nas células expostas à metilona como à 3,4-DMMC foi possível observar vacúolos citoplasmáticos, sugerindo a indução de autofagia. Este resultado foi corroborado pela deteção de vesículas acídicas intracelulares após marcação com laranja de acridina. A exposição das células HK-2 às catinonas na presença dos inibidores da autofagia promoveu o aumento da morte celular, evidenciando o papel protetor da autofagia na nefrotoxicidade das catinonas sintéticas. Surpreendentemente, verificou-se igualmente um aumento significativo da morte celular na presença dos inibidores da apoptose, sendo necessários estudos adicionais para elucidar as vias envolvidas. Foi também demonstrado que os agentes antioxidantes estudados potenciaram significativamente a morte celular induzida pela metilona e pela 3,4-DMMC, o que poderá estar relacionado com a inibição da autofagia mediada por espécies reativas de oxigénio e consequente potenciação da morte celular por apoptose. Contudo, serão necessários estudos futuros para verificar esta hipótese.