Estudo de variantes genéticas na via IL-6/IL-6R, valor preditivo e prognóstico em cancro da próstata: farmacogenómica, epidemiologia molecular e análise funcional in vitro.

• Autor(a) principal: Azevedo, Andreia Sofia Mateus
• Data de Publicação: 2010
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/2164

O complexo IL-6/sIL-6R poderá ser um factor de progressão do carcinoma prostático. Vários estudos demonstraram que níveis mais elevados de IL-6 e seu receptor influenciam o prognóstico do cancro da próstata. O esclarecimento de um eventual envolvimento da via Interleucina-6/Receptor da Interleucina-6 na susceptibilidade e agressividade do cancro da próstata e no desenvolvimento de resistência à castração hormonal poderão contribuir para a definição de estratégias de individualização do tratamento e quimioprevenção do cancro da próstata. No entanto, ainda permanece por esclarecer o papel de variantes funcionais em genes que codificam proteínas desta via. Variantes genéticas funcionais presentes nos genes IL6, IL6R e gp130 poderão estar envolvidas na repercussão funcional das respectivas proteínas e influenciar a susceptibilidade, agressividade e resposta ao tratamento no cancro da próstata. Neste estudo retrospectivo exploratório do tipo caso-controlo, foram analisadas amostras de DNA de 1735 indivíduos homens, dos quais 1263 apresentavam diagnóstico histopatológico de cancro da próstata e 472 doença benigna prostática ou normal. A análise dos polimorfismos IL6 -174 G>C, IL6 -572 G>C, IL6 -597 G>A e gp130 Gly148Agr foi realizada por polymerase chain reaction – restriction fragment length polymorphism. Os polimorfismos IL6 -6331 T>C e IL6R Asp358Ala foram analisados por discriminação alélica, através de Real-Time PCR. Os haplótipos mais frequentes (GGG e AGC) foram clonados no vector pGL-3 e foram transfectados em células de cancro da próstata (PC3). Os resultados mostram ausência de diferenças com significado estatístico entre as frequências genotípicas no grupo de indivíduos com cancro da próstata e no grupo controlo para os polimorfismos IL6R Asp358Ala, gp130 Gly148Arg, IL6 -597 G>A, IL6 -572 G>C e IL6 -174 G>C, quando analisados individualmente. Os portadores do genótipo TT para o polimorfismo IL6 -6331 T>C apresentam tendência para risco aumentado de cancro da próstata (OR=1.47; IC 95%=1.00-2.2; P=0.060). Relativamente ao polimorfismo gp130 Gly148Arg verificou-se que o alelo C estava associado com o desenvolvimento de recidiva bioquímica (P=0.043). Os portadores TT para o polimorfismo IL6 -6331 T>C apresentam risco para PSA≥20ng.mL-1 (P=0.004) e IMC≥30 (P=0.040). No polimorfismo IL6 -174 G>C verificou-se que os portadores C apresentavam risco acrescido para doença mais agressiva (PSA≥20ng.mL-1, P=0.012; metastização à distância, P=0.089; pior sobrevivência global, P=0.033). A análise univariada de Kaplan-Meier mostrou que o intervalo livre de progressão durante a castração hormonal era O complexo IL-6/sIL-6R poderá ser um factor de progressão do carcinoma prostático. Vários estudos demonstraram que níveis mais elevados de IL-6 e seu receptor influenciam o prognóstico do cancro da próstata. O esclarecimento de um eventual envolvimento da via Interleucina-6/Receptor da Interleucina-6 na susceptibilidade e agressividade do cancro da próstata e no desenvolvimento de resistência à castração hormonal poderão contribuir para a definição de estratégias de individualização do tratamento e quimioprevenção do cancro da próstata. No entanto, ainda permanece por esclarecer o papel de variantes funcionais em genes que codificam proteínas desta via. Variantes genéticas funcionais presentes nos genes IL6, IL6R e gp130 poderão estar envolvidas na repercussão funcional das respectivas proteínas e influenciar a susceptibilidade, agressividade e resposta ao tratamento no cancro da próstata. Neste estudo retrospectivo exploratório do tipo caso-controlo, foram analisadas amostras de DNA de 1735 indivíduos homens, dos quais 1263 apresentavam diagnóstico histopatológico de cancro da próstata e 472 doença benigna prostática ou normal. A análise dos polimorfismos IL6 -174 G>C, IL6 -572 G>C, IL6 -597 G>A e gp130 Gly148Agr foi realizada por polymerase chain reaction – restriction fragment length polymorphism. Os polimorfismos IL6 -6331 T>C e IL6R Asp358Ala foram analisados por discriminação alélica, através de Real-Time PCR. Os haplótipos mais frequentes (GGG e AGC) foram clonados no vector pGL-3 e foram transfectados em células de cancro da próstata (PC3). Os resultados mostram ausência de diferenças com significado estatístico entre as frequências genotípicas no grupo de indivíduos com cancro da próstata e no grupo controlo para os polimorfismos IL6R Asp358Ala, gp130 Gly148Arg, IL6 -597 G>A, IL6 -572 G>C e IL6 -174 G>C, quando analisados individualmente. Os portadores do genótipo TT para o polimorfismo IL6 -6331 T>C apresentam tendência para risco aumentado de cancro da próstata (OR=1.47; IC 95%=1.00-2.2; P=0.060). Relativamente ao polimorfismo gp130 Gly148Arg verificou-se que o alelo C estava associado com o desenvolvimento de recidiva bioquímica (P=0.043). Os portadores TT para o polimorfismo IL6 -6331 T>C apresentam risco para PSA≥20ng.mL-1 (P=0.004) e IMC≥30 (P=0.040). No polimorfismo IL6 -174 G>C verificou-se que os portadores C apresentavam risco acrescido para doença mais agressiva (PSA≥20ng.mL-1, P=0.012; metastização à distância, P=0.089; pior sobrevivência global, P=0.033). A análise univariada de Kaplan-Meier mostrou que o intervalo livre de progressão durante a castração hormonal era significativamente menor nos portadores TT do polimorfismo IL6 -6331 T>C em comparação com os portadores C (102.5 e 107.3 meses, respectivamente; P=0.027). Relativamente à sobrevivência global verificou-se que os portadores C do polimorfismo IL6 -572 G>C se encontram sobre-representados no grupo de doentes que morreram por CaP (P=0.002). A análise da combinação dos polimorfismos funcionais dos genes IL6R e gp130, segundo um perfil genético de sinalização celular, revelou que os altos sinalizadores apresentam risco aumentado para desenvolver cancro da próstata (P=0.010). Relativamente ao perfil genético combinado das variantes da região promotora do gene IL6, verificou-se que os portadores do perfil genético de elevada/intermédia expressão de IL-6 apresentam risco acrescido para doença mais agressiva, nomeadamente estadio avançado (P=0.040), metastização à distância (P=0.023) e PSA ≥20ng.mL-1 (P=0.001). A análise das variantes nos genes IL6, IL6R e gp130 de forma combinada de acordo com a sua repercussão funcional, permitiu observar que os portadores de um perfil genético de elevada activação da via IL-6/IL-6R apresentam associação com a resistência à castração hormonal (P=0.021) e com a ocorrência metastização à distância (P=0.017). Os portadores deste perfil genético ainda apresentam um aparecimento precoce de resistência à castração hormonal (P=0.021). A transfecção das linhas celulares PC3 in vitro com os vectores IL6GGG-Luc e IL6AGC-Luc, demonstrou ausência do efeito dos polimorfismos nos loci -174, -572 e -597 da região promotora do gene IL6 na transcrição genética. O estudo do perfil genético combinado das variantes genéticas nos genes IL6, IL6R e gp130 de acordo com a sua repercussão funcional revelou a sua importância na susceptibilidade genética e no desenvolvimento de um fenótipo mais agressivo. Também se demonstrou a sua influência no intervalo livre de progressão em doentes submetidos a castração hormonal. Estes resultados garantem que estudos futuros poderão esclarecer de que modo estes polimorfismos contribuirão para caracterizar os mecanismos moleculares envolvidos no cancro da próstata.