Determination of antipsychotic drugs in oral fluid samples using dried saliva spots

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Caramelo, Débora Almeida
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: eng
Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
Texto Completo: http://hdl.handle.net/10400.6/10156
Resumo: The present work describes the optimization and validation of an analytical method for the determination of six antipsychotic drugs (chlorpromazine, levomepromazine, cyamemazine, clozapine, haloperidol and quetiapine) in oral fluid samples after solvent extraction from dried saliva spots, by gas chromatography coupled to tandem mass spectrometry. The method was fully validated, and the included parameters were selectivity, linearity, limits of quantification, precision and accuracy, stability and recovery. The method was linear for all compounds from 10-400 ng/mL, except for haloperidol (5-100 ng/mL), presenting coefficients of determination higher than 0.99. Inter- and intra-day precision and accuracy were in conformity with the criteria usually seen in bioanalytical method validation, i.e., coefficients of variation were lower than 15% and an accuracy of 15% or better for all studied drugs. The recoveries obtained with this miniaturized technique ranged from 63 to 97%. The herein described method is the first to be reported using the dried saliva spots approach for the analysis of these antipsychotic drugs, proving great sensitivity apart from its simple and fast procedure. The method was considered a good alternative to the conventional techniques to be applied in clinical and toxicological analyses, even more taking into account the extremely low sample volume used (50 µL)
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spelling Determination of antipsychotic drugs in oral fluid samples using dried saliva spotsAntipsicóticosDried Saliva SpotsFluido OralGc-Ms/MsDomínio/Área Científica::Ciências Naturais::Ciências QuímicasThe present work describes the optimization and validation of an analytical method for the determination of six antipsychotic drugs (chlorpromazine, levomepromazine, cyamemazine, clozapine, haloperidol and quetiapine) in oral fluid samples after solvent extraction from dried saliva spots, by gas chromatography coupled to tandem mass spectrometry. The method was fully validated, and the included parameters were selectivity, linearity, limits of quantification, precision and accuracy, stability and recovery. The method was linear for all compounds from 10-400 ng/mL, except for haloperidol (5-100 ng/mL), presenting coefficients of determination higher than 0.99. Inter- and intra-day precision and accuracy were in conformity with the criteria usually seen in bioanalytical method validation, i.e., coefficients of variation were lower than 15% and an accuracy of 15% or better for all studied drugs. The recoveries obtained with this miniaturized technique ranged from 63 to 97%. The herein described method is the first to be reported using the dried saliva spots approach for the analysis of these antipsychotic drugs, proving great sensitivity apart from its simple and fast procedure. The method was considered a good alternative to the conventional techniques to be applied in clinical and toxicological analyses, even more taking into account the extremely low sample volume used (50 µL)A esquizofrenia é considerada uma das doenças mentais que mais incapacidade causa em todo o mundo, afetando 1% da população. São múltiplas as causas que podem dar origem a esta doença, tais como fatores bioquímicos, hereditários, entre outros. Atualmente não se dispõe de uma cura mas a minimização dos seus sintomas é conseguida através da administração de medicamentos e/ou terapias psicossociais. Nos últimos anos, o tratamento desta doença mental teve um grande impacto na área da investigação, visto que o número de suicídios em relação a pacientes esquizofrénicos foi aumentando ligeiramente. O tratamento da esquizofrenia é realizado através de medicação antipsicótica que tem como objetivo principal atenuar os sintomas psicóticos. Consoante o diagnóstico do paciente, é importante que exista uma vigilância na administração de antipsicóticos de forma a evitar overdoses ou erros na medicação. Segundo o relatório da INFARMED, o consumo de antipsicóticos em Portugal entre 2000 e 2012 aumentou, tendo como principais causas a utilização prolongada destes fármacos e a facilidade com que se acede a estes. Estes tópicos levantam um importante problema de saúde pública, contribuindo para o desenvolvimento de investigações na área toxicológica e clínica. Em relação ao desenvolvimento de técnicas analíticas para a deteção e quantificação dos antipsicóticos, a amostra de fluido oral tem vindo a ter um grande impacto devido à sua facilidade de recolha e por ser considerada uma amostra não invasiva. Ultimamente, como técnica de extração de amostra, os dried saliva spots (DSS) têm sido utilizados na deteção de diversos tipos de fármacos, visto ser um processo que requer um baixo volume de saliva e o seu processo ser bastante simples e rápido. Tendo por base esta premissa o presente trabalho descreve o desenvolvimento, otimização e validação de um método analítico para a determinação de seis antipsicóticos (clorpromazina, levomepromazina, ciamemazina, clozapina, haloperidol e quetiapina) em saliva com recurso a DSS e a cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas em tandem (GC-MS/MS). Os fármacos estudados foram selecionados com base na sua prescrição e associação a efeitos tóxicos. Os padrões internos utilizados foram a clorpromazina-d3 e a promazina, visto que apresentam características químicas semelhantes às dos compostos em estudo. O método proposto foi totalmente validado quanto a seletividade, linearidade, limites de quantificação, precisão e exatidão, estabilidade e recuperação conforme os critérios internacionais sugerem. A otimização do processo de extração foi realizada de acordo com os seguintes parâmetros: escolha do solvente mais adequado (metanol acidificado), volume do solvente (2 mL), bem como o tempo de extração (5 minutos) e o tempo de secagem das amostras de fluido oral aplicadas nos DSS (1 hora). O método foi linear para todos os compostos numa gama de concentrações de 10-400 ng/mL, exceto para o haloperidol (5-100 ng/mL), apresentando coeficientes de determinação superiores a 0.99. A precisão e exatidão inter- e intra-dia foram realizadas de acordo com a validação bioanalítica do método, isto é, os coeficientes de variação apresentam-se abaixo dos 15% e uma exatidão de ± 15% ou inferior, para todos os fármacos em estudo. As recuperações obtidas com esta técnica miniaturizada variaram entre 63% a 97%. De forma a verificar a fiabilidade do método, este foi aplicado a amostras de fluido oral procedentes de doentes em tratamento com estes fármacos. Salienta-se que o método que aqui se descreve é o primeiro trabalho que utiliza DSS como técnica de extração para a análise de antipsicóticos. Os resultados apresentados permitem afirmar que a técnica proposta apresenta uma excelente sensibilidade (5-10 ng/mL) para além de ser um procedimento que a nível prático mostra uma maior simplicidade e rapidez comparativamente aos outros métodos de extração. Por outro lado, o volume de amostra constitui uma grande vantagem, visto que se utiliza apenas 50 µL de fluido oral. Assim sendo, este método representa uma excelente alternativa às técnicas convencionais na área da toxicologia e da monitorização clínica, permitindo melhorar a assistência ao doente, diminuir o risco de toxicidade, reduzir reações adversas e/ou interações farmacológicas como também a falha na adesão à terapêutica.Rosado, Tiago Alexandre PiresAlba, Maria Eugénia GallardouBibliorumCaramelo, Débora Almeida2020-03-20T17:16:47Z2019-07-162019-06-192019-07-16T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10400.6/10156TID:202348954enginfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-02-21T03:39:14Zoai:ubibliorum.ubi.pt:10400.6/10156Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T00:50:11.270979Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse
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