Purificação da enzima polifenoloxidase (PFO) de polpa de pinha (Annona squamosa L.) madura

• Main Author: LIMA,Eliza Dorotea Pozzobon de A.
• Publication Date: 2001
• Other Authors: PASTORE,Gláucia Maria, LIMA,Carlos Alberto de A.
• Format: Article
• Language: por
• Source: Food Science and Technology (Campinas)
• Download full: http://old.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0101-20612001000100021
• topic: purificação; polifenoloxidase; pinha; Annona squamosa L

A PFO (EC 1.10.3.2) extraída de polpa de pinha madura (Annona squamosa L.), foi parcialmente purificada por fracionamento em sulfato de amônio a 80% e purificada 411 (Fração I) e 118 (Fração II) vezes após cromatografia em coluna de troca iônica em DEAE-Toyopearl 650M, e 566 vezes em coluna de Toyopearl HW55F. A enzima da fração mais ativa foi caracterizada bioquimicamente. Quanto aos parâmetros cinéticos, a enzima apresentou valores de Km e Vmax de 7,14mM e 302,0 unidades/min/ml para catecol e 25,0mM e 180,2 unidades/min/ml para L-dopa respectivamente, substratos que demonstraram maior especificidade. O peso molecular foi estimado em 90.700 daltons através de filtração em gel Sephadex G-200. O teor de cobre da enzima purificada encontrado foi de 11ppm/peso da amostra liofilizada. Quanto à composição de aminoácidos, a PFO apresentou maiores teores de ácido aspártico, ácido glutâmico e lisina e menores teores de metionina, arginina e tirosina, com ausência de cisteína.