Avaliação de protocolo de diferenciação de condrócitos a partir de células-tronco mesenquimais e células-tronco com pluripotência induzida

• Autor(a) principal: Manrique, André Luiz de Oliveira
• Data de Publicação: 2018
• Tipo de documento: Artigo
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UCB
• Texto Completo: https://repositorio.ucb.br:9443/jspui/handle/123456789/11841
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; Condrócitos; Células-tronco mesenquimais - MSC; Células-tronco com pluripotência induzida - iPSC

O tecido cartilaginoso, um dos tipos de tecido conjuntivo, é composto por cartilagem articular, onde se encontra matriz extracelular e condrócitos, que representam cerca de 1-5% da cartilagem. Os condrócitos são de extrema importância para a matriz, pois conferem componentes reguladores da matriz que permitem a manutenção necessária para a integridade do tecido. Algumas doenças podem causar a degradação da cartilagem, a qual pode ser reparada por técnicas como a bioimpressão tridimensional, implante de biomateriais e também o transplante de células-tronco. Este trabalho visa otimizar protocolos de diferenciação de condrócitos a partir de células-tronco com pluripotência induzida (iPSC) e células-tronco mesenquimais (MSC), visando auxiliar em futuras pesquisas e tendo como possível vantagem terapêutica a possibilidade de se utilizar células do próprio paciente. A diferenciação foi realizada com método de indução de meio condicionado cultivado de condrócitos, em um período de 28 dias. Para comprovação da diferenciação foram aplicados testes morfológicos (comparação da morfologia e coloração da matriz com Alcian Blue) e testes moleculares (análise da expressão gênica por qPCR). Era esperada a diferenciação dos dois tipos celulares em condrócitos mais especificamente de MSC, uma vez que não há registros na literatura de diferenciação de iPSCs utilizando a junção da técnica de meio condicionado com a indução direta em condrócitos. Os resultados para MSC foram negativos tanto para os testes morfológicos quanto para os moleculares. Já para as iPSC, a morfologia se assemelhou à de condrócitos descritos na literatura. Ao final da diferenciação foi observada coloração da matriz e a análise de expressão gênica foi positiva para 2 dos 3 marcadores gênicos indicadores de condrócitos testados (SOX9 e Col2a1). Concluiu-se que para células MSC seriam necessários mais dias em cultivo de diferenciação e testes com outras linhagens de MSC (triplicata biológica); as iPSC diferenciaram e podem ser estudadas futuramente para pesquisas de terapia celular.