Identificação de inibidores de proteinase do tipo Kunitz com atividade antimicrobiana em cormos de Xanthosoma blandum

• Autor(a) principal: Souza Filho, Carlos Roberto de
• Data de Publicação: 2011
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UCB
• Texto Completo: https://repositorio.ucb.br:9443/jspui/handle/123456789/7999
• topic: CNPQ::OUTROS::BIOMEDICINA; Biomedicina; Iinibidor de proteinase do tipo Kunitz; Xanthosoma; Peptídeos antimicrobianos

infecção hospitalar é um grave problema mundial devido ao desenvolvimento de resistência antimicrobiana aos antibióticos convencionais. Por outro lado, as plantas estão expostas a uma grande variedade de organismos potencialmente patogênicos, gerando proteínas antimicrobianas com espectro bifuncional, as quais também exercem ação de inibidores de proteinase. O objetivo deste trabalho consistiu em avaliar atividade antibacteriana em cormos de 12 espécies do gênero Xanthosoma contra 05 patógenos humanos bem como, elucidar o composto efetivo da atividade antimicrobiana e anti-proteinase. Para tanto, os cormos foram submetidos à extração protéica com uma solução de 0,6 M NaCl e 0,1 % HCl, seguida de precipitação com (NH4)2SO4 (100%) e diálise contra a água (cut off 3,5 kDa) constituindo assim, a fração rica em proteínas (FRP). Os bioensaios foram efetuadas em caldo LB utilizando a FRP (100 μg.mL-1), NaCl 0,85 %¨(C-) e cloranfenicol 40 μg.ml-1 (C+). A FRP de X. blandum foi aplicada em uma coluna semi-preparativa (Vydac C-18TP 522) de HPLC. A fração majoritária 07 obtida, eluída em 49 % de acetonitrila, exibiu uma inibição de 62 % no crescimento de Salmonella typhimurium. A análise em gel de Tris-Tricina revelou uma proteína de 24 kDa com 63 % de similaridade a inibidores do tipo Kunitz. Posteriormente, submetida à avaliação da atividade anti-proteinase frente a tripsina bovina e um pool de proteinases de S. typhimurium, demonstrou respectivamente, inibição de 63 e 85% da atividade enzimática. Desta forma Xb-KTI se apresenta como o primeiro inibidor de espectro bifuncional descrito em cormos, detentor de potencial biotecnológico na prospecção ou modelagem de drogas ativas contra bactérias patogênicas humanas.