Engenharia tecidual: desenvolvimento de um novo scaffold injetável para aplicação na área da saúde
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações do UCpel |
Texto Completo: | http://tede.ucpel.edu.br:8080/jspui/handle/tede/668 |
Resumo: | A engenharia tecidual envolve tipicamente três componentes principais, os quais são denominados de pilares da engenharia tecidual: células responsivas (ex. células tronco), scaffolds e moléculas sinalizadoras (tais como proteínas e fatores de crescimento). Os scaffolds são estruturas tridimensionais que proporcionam um suporte para as células e servem de guia para a colonização, proliferação e diferenciação celular. Nos últimos anos, polímeros sintéticos e naturais, vêm sendo investigados como biomateriais para ampla gama de aplicações, incluindo regeneração tecidual e engenharia de tecidos. No entanto, biomateriais nacionais, para as mais variadas aplicações, não são disponíveis, levando à dependência de tecnologia externa e fazendo com que um mercado em ampla expansão seja desprestigiado no cenário nacional. Neste sentido, o presente estudo tem por objetivo desenvolver e caracterizar um novo scaffold injetável proveniente da alga rodofícea Gigartina skottsbergii encontrada no continente latino americano, o qual juntamente com os seus bioprodutos possa ser empregado em engenharia tecidual e terapia celular, com aplicação inicial na área médica. Para tanto, foi sintetizado e processado um gel a partir da alga G. Skottsbergii, o qual foi analisado e testado como um novo scaffold. Assim, foi avaliada a viabilidade e capacidade de adesão celular do scaffold, utilizando-se o ensaio colorimétrico de WST-1 e microscopia eletrônica de varredura (MEV), frente a uma linhagem celular imortalizada de fibroblastos embrionários de rato (NIH/3T3). A avaliação dos dados foi realizada utilizando a Análise de Variância (ANOVA) de duas vias seguido pelo teste de Tukey com nível de significância de p<0,05. Neste sentindo, foi possível observar a estrutura tridimensional da alga marinha, assim como o comportamento das células NIH/3T3 frente a esta estrutura. Observa-se que as células encontram-se em grande quantidade e fortemente aderidas a estrutura da alga, mantendo uma morfologia alongada e com prolongamentos. Com relação a avaliação da estrutura tridimensional do hidrogel proveniente da alga G. Skottsbergii e a morfologia das células NIH/3T3 semeadas sobre este, foram ser observadas grandes áreas para a adesão celular, onde são visualizadas estruturas laminares e filamentares que se interconectam, aderido a esta estrutura é possível observar células NIH/3T3 com morfologia alongada e prolongamentos. Alem disso, observou-se que houve uma maior viabilidade celular no grupo que continha uma diluição de 1/4 do gel proveniente da alga G. Skottsbergii com 5 horas e cultivo e com 48 horas de cultivo. |
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Engenharia tecidual: desenvolvimento de um novo scaffold injetável para aplicação na área da saúdecarragenina; hidrogel injetável; Gigartina skottsbergiiCIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA##-969369452308786627##600A engenharia tecidual envolve tipicamente três componentes principais, os quais são denominados de pilares da engenharia tecidual: células responsivas (ex. células tronco), scaffolds e moléculas sinalizadoras (tais como proteínas e fatores de crescimento). Os scaffolds são estruturas tridimensionais que proporcionam um suporte para as células e servem de guia para a colonização, proliferação e diferenciação celular. Nos últimos anos, polímeros sintéticos e naturais, vêm sendo investigados como biomateriais para ampla gama de aplicações, incluindo regeneração tecidual e engenharia de tecidos. No entanto, biomateriais nacionais, para as mais variadas aplicações, não são disponíveis, levando à dependência de tecnologia externa e fazendo com que um mercado em ampla expansão seja desprestigiado no cenário nacional. Neste sentido, o presente estudo tem por objetivo desenvolver e caracterizar um novo scaffold injetável proveniente da alga rodofícea Gigartina skottsbergii encontrada no continente latino americano, o qual juntamente com os seus bioprodutos possa ser empregado em engenharia tecidual e terapia celular, com aplicação inicial na área médica. Para tanto, foi sintetizado e processado um gel a partir da alga G. Skottsbergii, o qual foi analisado e testado como um novo scaffold. Assim, foi avaliada a viabilidade e capacidade de adesão celular do scaffold, utilizando-se o ensaio colorimétrico de WST-1 e microscopia eletrônica de varredura (MEV), frente a uma linhagem celular imortalizada de fibroblastos embrionários de rato (NIH/3T3). A avaliação dos dados foi realizada utilizando a Análise de Variância (ANOVA) de duas vias seguido pelo teste de Tukey com nível de significância de p<0,05. Neste sentindo, foi possível observar a estrutura tridimensional da alga marinha, assim como o comportamento das células NIH/3T3 frente a esta estrutura. Observa-se que as células encontram-se em grande quantidade e fortemente aderidas a estrutura da alga, mantendo uma morfologia alongada e com prolongamentos. Com relação a avaliação da estrutura tridimensional do hidrogel proveniente da alga G. Skottsbergii e a morfologia das células NIH/3T3 semeadas sobre este, foram ser observadas grandes áreas para a adesão celular, onde são visualizadas estruturas laminares e filamentares que se interconectam, aderido a esta estrutura é possível observar células NIH/3T3 com morfologia alongada e prolongamentos. Alem disso, observou-se que houve uma maior viabilidade celular no grupo que continha uma diluição de 1/4 do gel proveniente da alga G. Skottsbergii com 5 horas e cultivo e com 48 horas de cultivo.Tissue engineering typically involves three major components, which are termed tissue engineering pillars: responsive cells (stem cells), scaffolds and signaling molecules (such as proteins and growth factors). Scaffolds are three-dimensional structures that provide cell support and serve as a guide for cell colonization, proliferation and differentiation. In recent years, synthetic and natural polymers have been investigated as biomaterials for a wide range of applications, including tissue regeneration and tissue engineering. However, national biomaterials, for the most varied applications, are not available, leading to dependence on external technology and causing an expanding market to be discredited on the national scene. In this sense, the present study aims to develop and characterize a new injectable scaffold from Gigartina skottsbergii algae found in the Latin American continent, which together with its bioproducts can be used in tissue engineering and cell therapy, with initial application in the medical area. To do so, a gel was synthesized and processed from G. Skottsbergii, which was analyzed and tested as a new scaffold. Thus, the viability and cell adhesion capacity of the scaffold were evaluated using the WST-1 colorimetric assay, and scanning electron microscopy (SEM), against an immortalized mouse embryonic fibroblast (NIH/3T3) cell line. Data evaluation was performed using the two-way ANOVA followed by the Tukey test with a significance level of p <0.05. In this sense, it is possible to observe the three-dimensional structure of the G. skottsbergii algae, as well as the NIH/3T3 cells in this structure. It is observed that the cells are in great quantity and strongly adhered to the algae structure, maintaining an elongated morphology and with extensions. In relation to the evaluation of the three-dimensional structure of the hydrogel from the G. Skottsbergii algae and the morphology of the NIH/3T3 cells seeded on it, large areas can be observed for the cellular adhesion, and laminar and filamentar structures that interconnect are seen, adhered to this structure it is possible to observe NIH/3T3 cells with elongated morphology and extensions. Also, it is observed that there was a greater cell viability in the group containing a 1/4 dilution of the gel from the G. Skottsbergii algae with 5 hours and culture and also with 48 hours of culture. Keywords: carrageenan, injectable hydrogel, Gigartina skottsbergiiCoordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES##2075167498588264571##600Universidade Catolica de PelotasCentro de Ciencias da Saude##-7432574962795991241##600BrasilUCPelPrograma de Pos-Graduacao em Saude Comportamento##-1990782970254042025##600NEDEL, Fernandahttp://lattes.cnpq.br/9529308180586356LEON, Priscila Marques Moura dehttp://lattes.cnpq.br/8926433491253009ZANINI, Luciana Olivareshttp://lattes.cnpq.br/0609684146215013ROSA, Laísa Camerini da2017-12-19T11:50:51Z2017-12-08info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfROSA, Laísa Camerini da. Engenharia tecidual: desenvolvimento de um novo scaffold injetável para aplicação na área da saúde. 2017. 101 f. 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