Desenvolvimento de uma matriz de nanopartículas de FE3O4 funcionalizadas com galactomanana para a purificação de lectina Alfa-D-galactose ligante
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2020 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UECE |
Texto Completo: | https://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=95998 |
Resumo: | <div style="text-align: justify;"><span style="font-size: 10pt;">Nanopartículas de ferro possuem excelentes características como propriedades magnéticas, estabilidade química, tamanho de partículas que as configuram entre os materiais de alto potencial biotecnológico, em decorrência das possibilidades de aplicações. A utilização das nanoparticulas de ferro no isolamento de proteínas com a finalidade de reduzir o custo e tempo de purificação é uma alternativa além dos métodos tradicionais de purificação. As lectinas vegetais são proteínas capazes de se ligar reversivelmente a glicanos expostos na superfície celular sem alterar a estrutura covalente desses ligantes, a sua especificidade de reconhecimento de glicoconjugados faz dessa classe de proteínas alvos de estudos biológicos e farmacológicos. Nesta vertente o objetivo desse estudo foi desenvolver uma matriz de nanopartículas de ferro funcionalizadas com galactomananas para o isolamento de lectinas α-D-galactose ligante por cromatografia de afinidade. As nanopartículas foram obtidas por coprecipitação e submetidas a um processo de modificação de superfície com galactomanana mediante a reticulação com epicloridrina. O material foi caracterizado por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), potencial Zeta, tamanho de partícula, espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR), difração de raio-X (DRX), análise termogravimétrica (TGA). Os resultados mostraram que as partículas com galactomanana apresentam-se em escala nanométrica, além de exibirem melhor estabilidade em solução aquosa. O FT-IR mostrou bandas de absorções referentes a galactomanana que ficou imobilizado na superfície das nanopartículas de óxido de ferro. Assim a matriz formada isolou por afinidade a partir do extrato das sementes de Artocarpus incisa L mediante separação magnética a frutalina, como visto no perfil da eletroforese. Após o isolamento a lectina manteve sua atividade biológica, como evidenciado no ensaio de hemaglutinação. Em suma nanopartículas funcionalizadas com galactomanana foram eficazes como matriz de afinidade para isolamento de lectina α-D-galactose ligante. Palavras-chave: Caesalpinia pulcherrima. Galactomanana. Nanopartículas. Frutalina.</span></div> |
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Desenvolvimento de uma matriz de nanopartículas de FE3O4 funcionalizadas com galactomanana para a purificação de lectina Alfa-D-galactose liganteBiotecnologia Caesalpinia pulcherrima (Flamboyant-mirim) Galactomanana Nanopartículas<div style="text-align: justify;"><span style="font-size: 10pt;">Nanopartículas de ferro possuem excelentes características como propriedades magnéticas, estabilidade química, tamanho de partículas que as configuram entre os materiais de alto potencial biotecnológico, em decorrência das possibilidades de aplicações. A utilização das nanoparticulas de ferro no isolamento de proteínas com a finalidade de reduzir o custo e tempo de purificação é uma alternativa além dos métodos tradicionais de purificação. As lectinas vegetais são proteínas capazes de se ligar reversivelmente a glicanos expostos na superfície celular sem alterar a estrutura covalente desses ligantes, a sua especificidade de reconhecimento de glicoconjugados faz dessa classe de proteínas alvos de estudos biológicos e farmacológicos. Nesta vertente o objetivo desse estudo foi desenvolver uma matriz de nanopartículas de ferro funcionalizadas com galactomananas para o isolamento de lectinas α-D-galactose ligante por cromatografia de afinidade. As nanopartículas foram obtidas por coprecipitação e submetidas a um processo de modificação de superfície com galactomanana mediante a reticulação com epicloridrina. O material foi caracterizado por Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), potencial Zeta, tamanho de partícula, espectroscopia no infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR), difração de raio-X (DRX), análise termogravimétrica (TGA). Os resultados mostraram que as partículas com galactomanana apresentam-se em escala nanométrica, além de exibirem melhor estabilidade em solução aquosa. O FT-IR mostrou bandas de absorções referentes a galactomanana que ficou imobilizado na superfície das nanopartículas de óxido de ferro. Assim a matriz formada isolou por afinidade a partir do extrato das sementes de Artocarpus incisa L mediante separação magnética a frutalina, como visto no perfil da eletroforese. Após o isolamento a lectina manteve sua atividade biológica, como evidenciado no ensaio de hemaglutinação. Em suma nanopartículas funcionalizadas com galactomanana foram eficazes como matriz de afinidade para isolamento de lectina α-D-galactose ligante. Palavras-chave: Caesalpinia pulcherrima. Galactomanana. Nanopartículas. Frutalina.</span></div><div style="text-align: justify;"><span style="font-size: 10pt;">Iron nanoparticles have excellent magnetic properties, chemical stability, particle size and are configured as materials of high biotechnological potential with wide application possibilities, mainly in the isolation of plant lectins which are proteins capable of reversibly binding to glycans exposed on the cell surface without changing the covalent structure of these ligands, their specificity of glycoconjugate recognition makes this class of proteins targets for biological and pharmacological studies. The aim of this study is to develop a matrix of iron nanoparticles functionalized with galactomannan for the isolation of α-D-galactose ligands by affinity chromatography. The nanoparticles were obtained by coprecipitation and subjected to a process of surface modification with galactomannan through crosslinking with epichlorohydrin. Scanning Electron Microscopy (SEM), Zeta potential, particle size, Fourier transform infrared spectroscopy (FT-IR), X-ray diffraction (XRD) and thermogravimetric analysis (TGA) were used to characterize them. The results showed that the particles with galactomannan have a nanometric scale, in addition to exhibiting better stability in aqueous solution. The FT-IR showed absorption bands referring to galactomannan that was immobilized on the surface of the iron oxide nanoparticles. The nanoparticles functionalized with galactomannan were effective as an affinity matrix for isolation of frutalin from the extract of the Artocarpus incisa seeds by magnetic separation as shown in electrophoresis. After isolation, lectin remained active, as evidenced in the hemagglutination test. Key-words: Caesalpinia pulcherrima. Galactomannan. Nanoparticles. Frutalin.</span></div>Universidade Estadual do CearáRenato de Azevedo MoreiraMendes, Francisco Rogênio da Silva2020-06-30T14:58:10Z2020info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://siduece.uece.br/siduece/trabalhoAcademicoPublico.jsf?id=95998info:eu-repo/semantics/openAccessporreponame:Repositório Institucional da UECEinstname:Universidade Estadual do Cearáinstacron:UECE2020-06-30T14:58:10Zoai:uece.br:95998Repositório InstitucionalPUBhttps://siduece.uece.br/siduece/api/oai/requestopendoar:2020-06-30T14:58:10Repositório Institucional da UECE - Universidade Estadual do Cearáfalse |
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