Atividade de compostos Quitosânico-Guanilados contra a formação de biofilme de isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Correia, Amanda dos Reis
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações da UEG
Texto Completo: http://www.bdtd.ueg.br/handle/tede/1114
Resumo: A Pseudomonas aeruginosa é considerada um dos principais agentes etiológicos em processos infecciosos no ambiente hospitalar. Se apresenta como uma bactéria oportunista e com considerável nível de resistência aos antimicrobianos. Diante da diminuição da eficácia dos antimicrobianos disponíveis na prática médica, há uma crescente demanda de compostos inovadores para o tratamento antimicrobiano. Neste contexto, a investigação de biomateriais como a quitosana, que é um polissacarídeo obtido pela desacetilação da quitina e que possui propriedades físico-químicas e biológicas interessantes, representa uma interessante alternativa devido à baixa propensão dos micro-organismos desenvolverem resistência, além do polímero e ser biocompatível, renovável e biodegradável. Um dos fatores limitantes de sua utilização é a baixa solubilidade em condição fisiológica. Entretanto, a quitosana pode adquirir novas propriedades quando modificada estruturalmente, expandindo suas formas de uso de acordo com o grupo ligado a ela. Este trabalho objetivou avaliar as propriedades biológicas da quitosana e de derivados quitosânico-guanilados com a avaliação da toxicidade pelo ensaio de letalidade de Artemia salina e estudo da atividade antimicrobiana com a determinação da concentração mínima inibitória (CMI) e da concentração mínima bactericida (CMB). Posteriormente foram avaliados o perfil de formação de biofilme pelos isolados clínicos de P. aeruginosa e o efeito de concentrações subinibitórias dos compostos na formação de biofilme por essas bactérias. Os resultados demonstraram que os compostos testados não apresentaram toxicidade para A. salina com CL50 acima de 1000 µg.mL-1 . Em relação à atividade antimicrobiana, a quitosana apresentou CMI de 1,25 a 2,5 mg.mL-1 e com CMB > 2,5 mg.mL-1 . As quitosanas-guaniladas mais ativas contra P. aeruginosa foram os compostos 3b e 3c com CMI de 0,625mg.mL-1 . A quitosana não demonstrou atividade bactericida contra os isolados de P. aeruginosa nas concentrações testadas, sendo a CMB > 2,5 mg.mL-1 . O composto mais ativo foi o derivado 3b com CMB de 0,625 mg.mL-1 contra a P. aeruginosa ATCC 27853 e variando entre 1,25 e > 2,5 mg.mL-1 para os demais isolados. A formação de biofilme foi observada nas 13 P. aeruginosa, sendo 6 classificadas como formadoras fortes, 4 como formadoras moderadas e 3 como formadoras débeis. O efeito dos compostos na formação de biofilme foi variável nos 9 isolados testados. A quitosana propiciou discreta diminuição das células viáveis nos biofilmes em 77,78% das P. aeruginosa enquanto que as quitosanas-guaniladas 3a e 3b diminuíram o biofilme em 66,66% e 33,33% dos isolados, respectivamente. Os derivados quitosânico-guanilados não apresentaram melhora significativa nas suas características de solubilidade em pH fisiológico em relação à quitosana. A quitosana e as quitosanas-guaniladas apresentaram baixo grau de toxicidade e baixa atividade contra a formação de biofilme pelos isolados clínicos de P. aeruginosa. Estudos posteriores devem ser realizados para corroborar nossos achados.
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Neste contexto, a investigação de biomateriais como a quitosana, que é um polissacarídeo obtido pela desacetilação da quitina e que possui propriedades físico-químicas e biológicas interessantes, representa uma interessante alternativa devido à baixa propensão dos micro-organismos desenvolverem resistência, além do polímero e ser biocompatível, renovável e biodegradável. Um dos fatores limitantes de sua utilização é a baixa solubilidade em condição fisiológica. Entretanto, a quitosana pode adquirir novas propriedades quando modificada estruturalmente, expandindo suas formas de uso de acordo com o grupo ligado a ela. Este trabalho objetivou avaliar as propriedades biológicas da quitosana e de derivados quitosânico-guanilados com a avaliação da toxicidade pelo ensaio de letalidade de Artemia salina e estudo da atividade antimicrobiana com a determinação da concentração mínima inibitória (CMI) e da concentração mínima bactericida (CMB). Posteriormente foram avaliados o perfil de formação de biofilme pelos isolados clínicos de P. aeruginosa e o efeito de concentrações subinibitórias dos compostos na formação de biofilme por essas bactérias. Os resultados demonstraram que os compostos testados não apresentaram toxicidade para A. salina com CL50 acima de 1000 µg.mL-1 . Em relação à atividade antimicrobiana, a quitosana apresentou CMI de 1,25 a 2,5 mg.mL-1 e com CMB > 2,5 mg.mL-1 . As quitosanas-guaniladas mais ativas contra P. aeruginosa foram os compostos 3b e 3c com CMI de 0,625mg.mL-1 . A quitosana não demonstrou atividade bactericida contra os isolados de P. aeruginosa nas concentrações testadas, sendo a CMB > 2,5 mg.mL-1 . O composto mais ativo foi o derivado 3b com CMB de 0,625 mg.mL-1 contra a P. aeruginosa ATCC 27853 e variando entre 1,25 e > 2,5 mg.mL-1 para os demais isolados. A formação de biofilme foi observada nas 13 P. aeruginosa, sendo 6 classificadas como formadoras fortes, 4 como formadoras moderadas e 3 como formadoras débeis. O efeito dos compostos na formação de biofilme foi variável nos 9 isolados testados. A quitosana propiciou discreta diminuição das células viáveis nos biofilmes em 77,78% das P. aeruginosa enquanto que as quitosanas-guaniladas 3a e 3b diminuíram o biofilme em 66,66% e 33,33% dos isolados, respectivamente. Os derivados quitosânico-guanilados não apresentaram melhora significativa nas suas características de solubilidade em pH fisiológico em relação à quitosana. A quitosana e as quitosanas-guaniladas apresentaram baixo grau de toxicidade e baixa atividade contra a formação de biofilme pelos isolados clínicos de P. aeruginosa. Estudos posteriores devem ser realizados para corroborar nossos achados.Pseudomonas aeruginosa is considered one of the main etiological agents in infectious processes in the hospital environment. It is an opportunistic pathogen with a considerable level of antimicrobial resistance. With the decreasing effectiveness of antimicrobials available in medical practice, there is a growing demand for innovative compounds for antimicrobial treatment. In this context, the investigation of biomaterials such as chitosan, which is a polysaccharide obtained by the deacetylation of chitin and which has interesting physicochemical and biological properties, represents an interesting alternative due to the low propensity of microorganisms to develop resistance, in addition to the polymer and be biocompatible, renewable and biodegradable. One of the limiting factors of its use is its low solubility under physiological conditions. However, chitosan can acquire new properties when structurally modified, expanding its uses according to the group attached to it. This work aimed to evaluate the biological properties of chitosan and chitosan-guanylated derivatives with the evaluation of toxicity with Artemia salina lethality assay and study of the antimicrobial activity with the determination of the minimum inhibitory concentration (MIC) and the minimum bactericidal concentration (MBC). Subsequently, the profile of biofilm formation by clinical isolates of P. aeruginosa and the effect of subinhibitory concentrations of compounds on biofilm formation by these bacteria were evaluated. The results showed that the tested compounds did not show toxicity to A. salina with LC50 above 1000 µg.mL-1 . Regarding the antimicrobial activity, chitosan presented MIC from 1.25 to 2.5 mg.mL-1 and with CMB > 2.5 mg.mL-1 . The most active guanylated chitosans against P. aeruginosa were compounds 3b and 3c with MIC of 0.625mg.mL-1 . Chitosan did not demonstrate bactericidal activity against P. aeruginosa isolates at the concentrations tested, with CMB > 2.5 mg.mL-1 . The most active compound was derivative 3b with CMB of 0.625 mg.mL-1 against P. aeruginosa ATCC 27853 and ranging from 1.25 to > 2.5 mg.mL-1 for the other isolates. Biofilm formation was observed in 13 P. aeruginosa, 6 were classified as strong formers, 4 as moderate formers and 3 as weak formers. The effect of the compounds on biofilm formation was variable in the 9 isolates tested. Chitosan provided a slight decrease in viable cells in biofilms in 77.78%, while chitosan-guanylated 3a and 3b decreased biofilm in 66.66% and 33.33% of the isolates, respectively. The chitosan-guanylated derivatives did not show significant improvement in their solubility characteristics at physiological pH in relation to chitosan. Chitosan and guanylated-chitosans showed a low degree of toxicity and low activity against biofilm formation by clinical isolates of P. aeruginosa. Further studies should be performed to corroborate our findings.Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPESConselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPqUniversidade Estadual de GoiásUEG ::Coordenação de Mestrado em Ciências Aplicadas a Produtos para SaúdeBrasilUEGPrograma de Pós-Graduação Stricto sensu em Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde (PPG-CAPS)Naves, Plínio Lázaro Faleirohttp://lattes.cnpq.br/3240685321742531Signini, Robertahttp://lattes.cnpq.br/2153212850866612Naves, Plínio Lázaro FaleiroCarneiro, Lilian CarlaEduardo, Anna Maly de Leão e NevesSantana, Eliete SouzaDamacena, LucianaCorreia, Amanda dos Reis2022-12-07T12:06:52Z2022-06-09info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfCORREIA, A.R. Atividade de compostos Quitosânico-Guanilados contra a formação de biofilme de isolados clínicos de Pseudomonas aeruginosa. 2022. 87 f. Dissertação (Mestrado Ciências Aplicadas a Produtos para Saúde) - Câmpus Central - Sede: Anápolis - CET - Ciências Exatas e Tecnológicas Henrique Santillo, Universidade Estadual de Goiás, Anápolis-GO.http://www.bdtd.ueg.br/handle/tede/1114porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações da UEGinstname:Universidade Estadual de Goiás (UEG)instacron:UEG2022-12-07T12:06:52Zoai:tede2:tede/1114Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttps://www.bdtd.ueg.br/PUBhttps://www.bdtd.ueg.br/oai/requestbibliotecaunucet@ueg.br||opendoar:2022-12-07T12:06:52Biblioteca Digital Brasileira de Teses e Dissertações da UEG - Universidade Estadual de Goiás (UEG)false
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