Fenazinas de pseudomonas aeruginosa : produção, purificação e avaliação do potencial antioxidante

• Autor(a) principal: Wessel, Kamila Byanca Baldin
• Data de Publicação: 2024
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UEL
• Texto Completo: https://repositorio.uel.br/handle/123456789/10806
• topic: Pseudomonas aeruginosa; Biotecnologia; Antioxidantes; Fenazinas; Pseudomonas aeruginosa; Phenazines

Resumo: Fenazinas são metabólitos secundários redox-ativos e pigmentados produzidos por Pseudomonas aeruginosa Estas moléculas exercem importantes atividades biológicas para a bactéria, contribuindo para a competitividade e virulência em hospedeiros humanos e animais Entretanto, quando purificadas estas biomoléculas podem apresentar propriedades antioxidantes, anti-inflamatórias e antitumorais com potencial de aplicação nas indústrias farmacêutica e cosmética Neste contexto, o objetivo deste estudo foi desenvolver um processo de produção, extração e purificação de fenazinas produzidas por Pseudomonas aeruginosa PAO1 e avaliar a atividade antioxidante destes compostos A suplementação do meio de cultivo com caseinato de sódio 1% incrementou a produção de diferentes fenazinas, em especial das piorubrinas, devido a uma maior ativação do sistema de quorum sensing da bactéria, sendo constatado que a produção deveria ocorrer por um período de 13 dias O melhor método de extração consistiu na utilização de clorofórmio na proporção de 1:1 (v/v) por duas vezes consecutivas, para obtenção de um extrato bruto mais concentrado A purificação do extrato bruto orgânico por cromatografia flash mostrou ser o método mais eficaz para a obtenção do composto amarelo 5-metil fenazina-1-carboxilato com maior pureza, entretanto a técnica de cromatografia em camada delgada preparativa também pareceu ser bastante promissora para a separação de diversos pigmentos relativamente puros Já a purificação do extrato aquoso, visando obter a fenazina vermelha aeruginosina A, pelo processo envolvendo o uso de carvão ativado como adsorvente seguido de extração em fase sólida utilizando sílica de partícula menor como fase estacionária, ainda não foram suficientes para atingir a pureza desejada O extrato bruto orgânico e o pigmento 5-metil fenazina-1-carboxilato purificado foram submetidos à análise de atividade antioxidante pelos métodos ABTS e FRAP De acordo com o ensaio de ABTS, constatou-se que o extrato bruto apresentou maior capacidade antioxidante, sendo encontrado que a concentração necessária para alcançar 5% da atividade antioxidante (IC5) foi de 5,83 ± ,6 µg mL-1 Porém, pelo método de redução dos íons de ferro (FRAP), foi encontrado que o pigmento apresentou uma atividade antioxidante maior em relação ao extrato com um valor de ,78 µmol L-1 Trolox/ µg mL-1 de extrato bruto Assim, os resultados mostraram que foi possível purificar pigmentos fenazínicos de Pseudomonas aeruginosa possibilitando testar sua atividade antioxidante in vitro Dessa forma, essas moléculas podem ser de grande interesse para formulações de produtos nas indústrias de cosméticos e farmacêutica