Efeito do fator de crescimento epidermal no desenvolvimento de folículos pré-antrais de fêmeas Bos taurus indicus cultivados in vitro

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Bergamo, Larissa Zamparone
Data de Publicação: 2024
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UEL
Texto Completo: https://repositorio.uel.br/handle/123456789/15963
Resumo: Resumo: O Fator de Crescimento Epidermal (EGF) é considerado um potente fator mitogênico para as células foliculares Produzido pelo oócito e pelas células da granulosa, o EGF possui um papel importante na modulação da foliculogênese ovariana O objetivo do presente trabalho foi testar a adição de diferentes concentrações de EGF ao meio de cultivo in vitro, por 5 ou 1 dias, sobre o desenvolvimento de folículos pré-antrais inclusos em fragmentos ovarianos bovinos Ovários (n=1) de fêmeas Bos taurus indicus (n=5) foram coletados em abatedouro local Fragmentos (n=9) de tecido ovariano com aproximadamente 3x3x1 mm foram obtidos de cada animal Um fragmento foi imediatamente fixado (fixador de Bouin) e processado para análise histológica (grupo controle; Dia), o restante foi colocado em MEM® (Gibco BRL, Rockville, MD, USA; osmolaridade 3 mOsm/L, pH 7,2) suplementado com penicilina (2 UI/mL) e estreptomicina (2 mg/mL) a 2° C, permanecendo por 1 hora (período de transporte até o laboratório) Os outros fragmentos foram cultivados in vitro durante 5 (D5) ou 1 dias (D1) em MEM+ ou MEM+ acrescido de diferentes concentrações de EGF (5, 1 ou 2 ng/mL), caracterizando os seguintes grupos: controle (D); MEM+ (D5); MEM + 5 ng/mL de EGF (D5); MEM + 1 ng/mL de EGF (D5); MEM + 2 ng/mL de EGF (D5); MEM+ (D1); MEM + 5 ng/mL de EGF (D1); MEM + 1 ng/mL de EGF (D1); MEM + 2 ng/mL de EGF (D1) Os folículos pré-antrais foram avaliados por microscopia óptica e classificados de acordo com a fase de desenvolvimento (primordial ou em desenvolvimento) e a morfologia (íntegro ou degenerado) As médias foram comparadas pelo teste de Tukey (p = ,5) Neste experimento, foram avaliados 223 folículos contidos em 72 cortes histológicos, totalizando 24 lâminas e 45 fragmentos ovarianos O tratamento controle não cultivado (D) continha predominantemente folículos pré-antrais nos estágios primordial (82,8%), alguns primários e, raramente, folículos secundários (17,2%) Houve um aumento no número de folículos em desenvolvimento quando adicionado 1 ng/mL de EGF ao meio de cultivo, por 1 dias (48,4%), quando comparado com o tratamento controle (17,2%) Desta maneira, concluímos que a adição de 1 ng/mL de EGF, por 1 dias, ao meio de cultivo in vitro de folículos pré-antrais bovinos foi eficiente em promover o desenvolvimento e manter a integridade folicular
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osmolarity 3 mOsm/L, pH 7,2) supplemented with penicillin (2 IU/mL) and streptomycin (2 mg/mL) at 2°C, remaining for 1 hour (period of transport to the laboratory) The other fragments were in vitro cultured for 5 (D5) or 1 days (D1) in MEM+ or MEM+ plus different concentrations of EGF (5, 1 or 2 ng/mL), as the following groups: control (D); MEM+ (D5); MEM + 5 ng/mL EGF (D5); MEM + 1 ng/mL EGF (D5); MEM + 2 ng/mL EGF (D5); MEM+ (D1); MEM + 5 ng/mL EGF (D1); MEM + 1 ng/mL EGF (D1); MEM + 2 ng/mL EGF (D1) The preantral follicles were evaluated by light microscopy and classified according to the stage of developmental (primordial or developing follicles) and morphology (intact or degenerate) The averages were compared by the Tukey's test (P = 5) In this experiment, 2,23 follicles in 72 histological sections were evaluated, totalizing 24 slides and 45 ovarian fragments The non-cultivated control treatment (D) predominantly presented preantral follicles at the primordial stage (828%), some primary follicles and rarely secondary follicles (172%) There was an increase in the number of developing follicles when 1 ng/mL EGF was added to the culture medium for 1 days (484%), compared to the control treatment (172%) In this way, we conclude that the addition of 1 ng/mL of EGF for 1 days to the in vitro culture medium of bovine preantral follicles was efficient in promoting follicles development and maintaining follicular integritySeneda, Marcelo Marcondes [Orientador]Silva-Santos, Kátia CristinaPfeifer, Luiz Francisco MachadoBergamo, Larissa Zamparone2024-05-01T14:58:57Z2024-05-01T14:58:57Z2017.0022.02.2017info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://repositorio.uel.br/handle/123456789/15963porMestradoCiência AnimalCentro de Ciências AgráriasPrograma de Pós-graduação em Ciência AnimalLondrinareponame:Repositório Institucional da UELinstname:Universidade Estadual de Londrina (UEL)instacron:UELinfo:eu-repo/semantics/openAccess2024-07-12T04:20:20Zoai:repositorio.uel.br:123456789/15963Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.bibliotecadigital.uel.br/PUBhttp://www.bibliotecadigital.uel.br/OAI/oai2.phpbcuel@uel.br||opendoar:2024-07-12T04:20:20Repositório Institucional da UEL - Universidade Estadual de Londrina (UEL)false
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description Resumo: O Fator de Crescimento Epidermal (EGF) é considerado um potente fator mitogênico para as células foliculares Produzido pelo oócito e pelas células da granulosa, o EGF possui um papel importante na modulação da foliculogênese ovariana O objetivo do presente trabalho foi testar a adição de diferentes concentrações de EGF ao meio de cultivo in vitro, por 5 ou 1 dias, sobre o desenvolvimento de folículos pré-antrais inclusos em fragmentos ovarianos bovinos Ovários (n=1) de fêmeas Bos taurus indicus (n=5) foram coletados em abatedouro local Fragmentos (n=9) de tecido ovariano com aproximadamente 3x3x1 mm foram obtidos de cada animal Um fragmento foi imediatamente fixado (fixador de Bouin) e processado para análise histológica (grupo controle; Dia), o restante foi colocado em MEM® (Gibco BRL, Rockville, MD, USA; osmolaridade 3 mOsm/L, pH 7,2) suplementado com penicilina (2 UI/mL) e estreptomicina (2 mg/mL) a 2° C, permanecendo por 1 hora (período de transporte até o laboratório) Os outros fragmentos foram cultivados in vitro durante 5 (D5) ou 1 dias (D1) em MEM+ ou MEM+ acrescido de diferentes concentrações de EGF (5, 1 ou 2 ng/mL), caracterizando os seguintes grupos: controle (D); MEM+ (D5); MEM + 5 ng/mL de EGF (D5); MEM + 1 ng/mL de EGF (D5); MEM + 2 ng/mL de EGF (D5); MEM+ (D1); MEM + 5 ng/mL de EGF (D1); MEM + 1 ng/mL de EGF (D1); MEM + 2 ng/mL de EGF (D1) Os folículos pré-antrais foram avaliados por microscopia óptica e classificados de acordo com a fase de desenvolvimento (primordial ou em desenvolvimento) e a morfologia (íntegro ou degenerado) As médias foram comparadas pelo teste de Tukey (p = ,5) Neste experimento, foram avaliados 223 folículos contidos em 72 cortes histológicos, totalizando 24 lâminas e 45 fragmentos ovarianos O tratamento controle não cultivado (D) continha predominantemente folículos pré-antrais nos estágios primordial (82,8%), alguns primários e, raramente, folículos secundários (17,2%) Houve um aumento no número de folículos em desenvolvimento quando adicionado 1 ng/mL de EGF ao meio de cultivo, por 1 dias (48,4%), quando comparado com o tratamento controle (17,2%) Desta maneira, concluímos que a adição de 1 ng/mL de EGF, por 1 dias, ao meio de cultivo in vitro de folículos pré-antrais bovinos foi eficiente em promover o desenvolvimento e manter a integridade folicular
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